产品名称:大鼠一型C端前胶原(PICP)elisa试剂盒
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产品规格:48T/96T
检测方法: ELISA酶联免疫法
说 明 书:随货发送,也可直接联系在线销售索取
测试种属:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、猪、鸡、鸭elisa试剂盒等种属
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
试剂盒保存及有效期:2-8℃,避光保存:6个月。
产品产地:进口/国产
产品库存:现货
品牌:自主研发/进口原装
产品价格:价格优惠,欢迎来电洽谈!
试剂盒使用范围:仅供科研检测,不得用于临床.
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简介酶联免疫吸附测定(enzyme-linkedimmunosorbent assay简称ELISA)是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。ELISA过程包括抗原(抗体)吸附在固相载体上称为包被,加待测抗原(抗体),再加相应酶标记抗体(抗原),生成抗原(抗体)-待测抗体(抗原)-酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体(抗原)的量。待测抗体(抗原)的定量与有色产生成正比。 二、ELISA试剂盒组成1. 微孔板 (固相抗体) 96 well2. 标记抗体 (30倍浓缩,HRP标记抗体) 0.4 ml3. 标准品 0.5 ml × 24. EIA缓冲液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 30 ml5. 标记抗体稀释液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 12 ml6. 显色液 (TMB底物液) 15 ml7. 终止液 (1N硫酸) 12 ml8. 洗涤缓冲浓缩液 (40倍浓缩,0.05% Tween-20的磷酸缓冲液) 50 ml三、ELISA法的应用1.免疫酶染色各种细胞内成分的定位。2.研究抗酶抗体的合成。3.显现微量的免疫沉淀反应。4.定量检测体液中抗原或抗体成分。 四、ELISA实验要点洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。(2)流水冲洗式 流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。五、标本的收集和保存1.要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。2.样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。3.冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。4.标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。六、公司现货报价标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。七、ELISA操作中的洗涤a)洗液不要溢出孔外,以免污染相邻的孔,特别是每次洗板的前两遍,若高浓度的孔污染了低浓度的孔或空白孔,其造成的交叉污染的孔是洗不掉的,背景肯定会增高。 b)特别注意:设计实验的时候要考虑实验孔的位置,保证甩掉洗液时,空白孔、低浓度孔或阴性对照组在上面或一侧或分开最好。同时注意甩掉洗液的动作翻转(从正上方旋转120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右摇摆、旋转来甩液体!甩出后以直线方式补2-3次甩出液体。 c)用干净的滤纸,不要用卫生纸,因为细小粉尘或者碎屑容易吸附到孔底,导致洗板不干净,结果偏高或偏低,重复孔的数值也会相差很大。d)每次拍板不要重复在一个地方拍,特别是洗去酶的步骤;拍板不宜过轻,否则拍不干净,拍板很用力不会对蛋白有什么影响。但注意不要太重,以至把板条给拍断。每次洗板后轻叩几下,最后一次一定要扣干净。e)不能减少洗液体积、洗板时间和次数。洗板时间太短,洗板效果不佳。延长洗板时间和增加洗板次数可以使背景更干净。八、样本处理及要求1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。九公司现货报价操作技术流程 1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:重复4的操作。8、洗板:重复5的操作。9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。 十、公司现货报价计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。十一、ELISA试剂盒检测范围和保存条件及有效期 1ng/L -30ng/L1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月 十二、ELISA试剂盒性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%十三、ELISA试剂盒常见问题问:比如说我偶然发现只加样本稀释液的也出现浅黄色,这怎么解释呢?答:可能的原因:1、洗板时有交叉感染 2、样本稀释液中本身有本底的一个较小的读数。也是ELISA的一个局限性,免疫的很多反应稀释液 洗涤液发挥了很重要的作用,不加的话效果不明显,但是加了以后有些成分可能有一部分的干扰作用。 可以比较不同的厂家的盒子 都存在这些局限性的,但不影响最终的结果。ELISA严格的说就是一个半定量的方法。问:特殊稀释液是做什么的?答:一般情况都不要用的,他的最大的用途就是稀释标准品。但是,现在标准品已经稀释好了 所以不需要用了。如果你需要更多的标准品,可以用他来稀释。问:ELISA试验的标准曲线和测定的重复性差,这是什么原因造成的?答:ELISA试验的标准曲线和测定的重复性差,这是典型的由测定操作引起的问题,常见原因如下: a)可能原因:ELISA加样本及试剂量不准;孔间不一致;解决方法:校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密。重复某一样品时,加样时间尽可能与第一次接近;重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;样品稀释前应充分混匀。b)可能原因:加样过快,孔间发生污染;解决方法:重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;加样不要过快。
ICP发射光谱仪作为一个分析仪器应用范围很广。它的特点是具有ppb级别的检测能力,5-6个数量级的检测浓度范围,并且可以批量处理多种元素。随着ICP的广泛使用,人们对缩短分析时间和改善复杂基体样品检测能力的需求日益增加。为此,我们开发了两种类型的产品,使用半导体检测器的全谱直读型以缩短分析时间,和高分辨顺序扫描型产品改善检出限。 岛津ICPE-9000全谱直读型产品,包括最新的ICPEsolution软件,与传统理念大相径庭。充分利用ICPE-9000的多种功能,样品测定中的问题可以用多种方式进行考察。分析助手功能可以自动进行测定元素的波长选择和共存元素的干扰校正,而以前这些工作依赖于分析工作者的经验。难以测定的复杂基体样品的简便准确测定也成为可能。•中阶梯光栅分光器和CCD检测器—高通量•采用真空光室—减少了光谱仪吹扫气的需求•配置了小炬管—低成本运行•长期测定也能保持卓越的稳定性—非常稳定的真空光谱仪
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断,具体说明书请联系客服索取,本说明书是通用模板,有些数据不准确.产品规格48T/96T 国产/RD进口分装/TSZ进口原装工作原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
性能特点1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:最低检测浓度小于(参考说明书)3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月
免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。本品为科研试剂,只对单位实验室学校等正规用途出售。如需资料请向客服索取!企业网站:www.yuduobio.com数十万产品随亲挑选,正规生物公司,可开具正规机打发票。发票需加6个点。
公司介绍
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