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酶联免疫试剂盒,人B因子ELISA试剂盒现货

      工作原理一.人B因子(BF)elisa试剂盒实验原理
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
二.试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
三.人B因子(BF)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存
1).细胞培养上清:
适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:
用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:
在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:
包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:
切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:
如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作流程四.人B因子(BF)ELISA试剂盒操作步骤
1)取出试剂盒,室温(20-25℃)放置30分钟。
2)分组:取出96孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6个浓度)、空白孔、待测样品组。
3)标准品的稀释:准备小试管6 只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第三只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第五只试管中,充分混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
4)加样:依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入50ul的蒸馏水;其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
5)温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒弃去,如此重复5 次,拍干。
7)加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液(空白对照孔除外)。
8)温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9)洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15-30s,充分清洗酶标板5次,用吸水纸彻底拍干。
10)显色:各孔加入显色剂A液50ul后,再加入显色剂B液50ul。
11)终止:25-37℃下避光反应10-15分钟,加入50ul终止液。
12)读板:在450nm波长读取各孔的OD值。
注:读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,读板时间控制在终止反应后的30分钟内,以免影响准确性。
五.数据计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,即为样品的实际浓度。
注意事项六.注意事项
1)实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
2)加样:加样时,要控制加样速度,避免第一孔与最后一孔间的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响实验的准确性以及重复性。
3)孵育:严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
4)建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。
5)建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商联系,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。
七.保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃
2.有效期:6个月
订购流程八.人B因子(BF)ELISA试剂盒订货说明
1)卖方确保所订产品与目录技术指标保持一致;
2)为了确保买方产品在运输中的质量,对有特殊要求的低温产品予以湿冰运输。
3)收到货物后如出现质量问题,买方需在收到货物一个月内向卖方提出书面异议。买方逾期不提出异议,视为货物符合其要求,卖方不付任何责任。
4)出现质量以外的问题,如破损等,买方应在收货后一个周内提出。买方未按时提出异议,视为该产品合格。
本公司对所有售出的产品保证质量,并提供良好的售后服务,有关产品质量的投诉,请在收到货物的32天内以书面形式提出,并向我公司技术人员提供相应的材料,我们会及时派人解决。所有形式的赔偿或退换仅限于产品本身,不涉及其他间接内容。凡购买本公司任意款elisa试剂盒,均可享受免费代测服务,并提供技术指导。
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人ELISA试剂盒,人B因子ELISA试剂盒

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规格:96T/48T

性状:盒装液体

保存: 2

利用ELISA进行临床检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

人ELISA试剂盒,人B因子ELISA试剂盒本试剂仅供研究使用

1、准备试剂,样品和标准品2、加入准备好的样品和标准品,37度反应30分钟3、洗板5次,加入酶标试剂,37度反应30分钟4、洗板5次,加入显色液AB37度显色10分钟5、加入终止液615分钟内读OD7、计算。

人ELISA试剂盒,人B因子ELISA试剂盒 实验规则:

1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最好有专业人员进行矫正。

2、要配备20ul50ul100ul1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。

3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。

4、实验时,要使底物避光保存。

5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。

6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。

7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。

8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。

9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。

10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。

11、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.40.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。

12、底物是光敏感的,要在临用前现配。

13、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。

14、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。

15、待检样品要澄清,否则会影响结果。

16、温浴时间应遵守试剂盒规定。

17、应尽量做双孔实验,这样才能保证数据的准确性。

18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

人ELISA试剂盒,人B因子ELISA试剂盒 产品购买流程:

1、银行汇款:汇款帐号向和您联系的销售人员索要

温馨提示:我公司是款到发货,所以请客户配合。如果您不放心我们会先给您签订合同,开好发票寄给您,您再打款。打款中请确认好账号和用户名,把你所需要的货物名称、数量。以及汇入银行钱数及时通知公司人员,然后把详细的收货地址、姓名电话告诉我们,以便我们及时发货。

2、发货方式:一般默认发快递,特殊情况是EMS

3、查货方法:向销售人员确定快递公司,拨打客服电话咨询或者登陆快递公司网站查询货物发货情况。

人ELISA试剂盒,人B因子ELISA试剂盒 产品订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。

2、部分非常用产品,需提前12日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。

3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日最新价格为准。

4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。

5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、电话等以传真、EMail、短信、电话等形式通知我们。

该公司产品分类: PCR试剂盒 其他方法试剂盒 血清 细胞 抗体 elisa试剂盒 犬elisa试剂盒 猫elisa试剂盒 试剂 标准品 小肠结肠炎耶尔森氏菌 溶血性链球菌 产气荚膜梭菌 蜡样芽孢杆菌 弯曲菌 四环素检定 酵母 弧菌检验系列 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌检验系列

人B因子Elisa试剂盒,BF试剂盒

人B因子Elisa试剂盒,BF试剂盒现货供应,款到即可发货,快递时间3天左右。

规格:96T/48T

保存条件:2-8℃低温保存

库存:现货供应

保质期:六个月

运输:快递运输(可根据客户要求,选择具体的运输方式,无特殊要求我公司一般为中通或韵达)

用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断

本公司的ELISA试剂盒,品质高,灵敏度好,曲线漂亮,无效包退包换,还可提供免费代测服务,各种种属、各种系列ELISA科研实验检测试剂盒,详情可来电咨询我公司销售人员或咨询我公司在线客服QQ。

人B因子Elisa试剂盒,BF试剂盒操作步骤:

1.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

2.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

3.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

4.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 

5.温育:

人B因子Elisa试剂盒,BF试剂盒注意事项:

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。

人B因子Elisa试剂盒,BF试剂盒样本收集与前期准备 

        利用ELISA进行临床检验常见的样本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。

(一) 临床样本的收集

A、血液样本

    有些生理因素,如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化,有些甚至还有昼夜变化。因此血液标本的采集应尽量避免生理因素干扰,以条件一致为宜,如无法避免,应在标本上注明该因素。

1.外周血

    一般选取左手无名指内侧采血,该部位应无冻疮,炎症,水肿,破损。如该部位不符合要求,以其他手指部位代替。对烧伤病人,可选择皮肤完整处采血。由于部分血液常规检测(如白细胞计数、分类等)受生理因素影响波动过大,比较时宜使条件尽量一致。涉及到体内出、凝血功能的检测项目(如血小板计数,出血时间或凝血时间等)的检测,一定要注意了解患者是否用过抗凝、促凝药物,以便在减少或避免干扰因素的影响。

2.静脉血

    除涉及各种止血和血栓检测等项目需采用抗凝静脉血血浆外,目前绝大多数检测项目的分析检测可直接采用静脉血的血清。在血清检测项目中,有些(如血糖,血脂等)受饮食及昼夜因素影响较大,一般以清晨空腹血标本为宜;有些在血中衰变较快(血清酶活性测定如ACP活性等),0~4℃贮存活性减弱也不一,这些项目的检测必须及时而快速;有些(如肌酸激酶等)受运动等因素影响较大。抽血时避免溶血的发生也十分重要,尤其涉及血钾,LDH等的测定。

B、尿液样本

    同血标本一样,尿液标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大,特别是饮食的影响,故一般来说晨尿优于随机尿。晨尿是指清晨起床后的次尿标本,较浓缩和酸化,有形成分(如血细胞,上皮细胞,管形)相对集中便于观察。随机尿即随意一次尿,留取方便,但受饮食、运动、药物影响较甚,易于出现假阳性和假阴性结果,如饮食性蛋白尿,饮食性糖尿,维生素C干扰潜血结果等。餐后尿(午餐后2小时收集的患者尿液)适用于尿糖,尿蛋白和尿胆原的检查,此时的尿标本可增加试验敏感性,检出较轻微的病变。12小时尿细胞计数即Addis计数(前晚8时排空膀胱后留取至次日晨8时的所有尿液),因时间较长,细菌易繁殖,须加入防腐剂甲醛。24小时尿(天晨8时排空膀胱后留取至次日晨8时的所有尿液)中化学物质的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羟类固醇,儿茶酚胺,Ca2+等,检测不同的物质,选择不同的防腐剂防腐。清洁中段尿多用于尿细菌培养,要求无菌,冲洗外阴后留取标本。所有尿标本的收集都应足量,最少12 ml,50 ml,定时尿须全部收集,对女性患者应避免阴道分泌物、经血污染尿标本。

C、粪便样本

    粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便,对外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即检查,从有脓血和稀软处取材,保温送检。查日本血吸虫虫卵时应取粘液、脓血部分,孵化毛蚴时至少留取30g粪便,且需尽快处理。检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围皱襞处拭取并立即镜检。隐血试验(化学法),试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂,维生素C等。所有粪便标本采集后1小时内应检查完毕,以防止有形成分受消化酶及pH的破坏,来不及检测的,应及时用PBS进行缓冲处理,离心去上清保存。

D、脑脊液样本

    脑脊液标本采集后立即送检,放置过久将影响检验结果:如细胞变性,破坏,导致计数和分类不准;有些化学物质如葡萄糖等将分解含量减少;细菌发生自溶影响细菌的检出率。脑脊液抽取后一般分装三个无菌管,管作细菌培养,第二管作化学分析和免疫学检查,第三管作一般性状及显微镜检查,三管的顺序不宜颠倒。因标本采集较难,全部送检和检测过程应注意安全。

E、胸腹水样本

    与脑脊液标本一样,采集后的标本注意安全,及时送检。一般也分装三管,一管作常规细胞学检查,一管生化检查,一管细菌培养,顺序以与脑脊液相同为宜。

F、前列腺液样本

    前列腺液标本由前列腺按摩后采集,液量少时直接滴在载玻片上及时送检,须注意防止标本蒸干,量多时收集在洁净干燥的试管中。若按摩不出前列腺液,可检查按摩后的尿液沉渣。

G、精液样本

    精液标本采集前应禁欲3~7天,排净尿液后可用手淫法或其他方法将精液直接排入干净的容器中,保温并及时送检。由于精子生成日间变动较大,一般应检查2~3次(每次间隔1~2周)方可做诊断。

H、阴道分泌物样本

    阴道标本采集前24小时应禁止房事、盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部上药等,取材所用器械需清洁。一般用盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道穹后部、宫颈管口等处取材,制成生理盐水涂片后观察阴道分泌物标本,经期的女性患者不宜检查阴道分泌物标本。

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