一、人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒实验原理
7月28日消息,据上海臻科午间发表:人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
二、人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒产品优势
1、优点明显 产品具有灵敏度高、特异性强的特点,具有稳定的重复性,吸附性能好,空白值低,并适用于血清血浆 组织匀浆等多种样本类型的检测,方法简单,操作方便,最大限度的节省了实验经费。
2、品质保障 产品保证质量,出库质检把控严格,保障提供给客户的100%是优质产品,运输全程跟踪,公司承诺有任何质量问题包退换,诚信经营,合作共赢。
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5、服务周到 设立售后服务中心,24小时及时响应,真正做到后顾无忧,不断完善服务体系。

三、人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒标本要求
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
五、人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒操作流程
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
六、人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒注意事项
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
3.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物请避光保存。
6.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
8.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
七、关于人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒其他相关试剂
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企业单位:上海恒远ELISA试剂盒供应商 产品单价:请来电询价(021-60517348)人表面膜免疫球蛋白A Human membrane IgA,mIgA ELISA KIT 产品规格:96人份/48人份 保存条件:2-8℃产地:美国实验方法: 酶联免疫法/酶免法(ELISA)检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA原理操作步骤 方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。 4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。 5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O?D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O?D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 方法二 用于检测未知抗体的间接法: 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。2、次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,一遍用DDW(超纯水)洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。3. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。4. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。5. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O?D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O?D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
【规格】48T/96T
【所需标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等.
【库存状态】现货供应,订单生成,立即安排发货。
【使用范围】仅供科研使用,不得用于临床。
【产品用途】用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
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人表面膜免疫球蛋白A(mIgA) elisa试剂盒厂家组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片(48) 2片(96)
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
链霉亲和素-HRP 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
生物素标记抗体 0.5ml×1瓶 1 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
人表面膜免疫球蛋白A(mIgA) elisa试剂盒厂家样品收集、处理及保存方法:
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法微量加样的性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的elisa试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。我公司其他小部分试剂:橄榄油/洋橄榄油/Olive oil但马胶/但马树脂/达麻脂/达玛胶/达玛树胶/娑罗双树脂/达马树脂/Gum dammar乳香胶/乳香/玛帝树胶/玛帝脂/玛帝树脂/玛缔脂/胶粘剂/乳香树脂/玛珶脂/粘胶乳香树胶/胶粘水泥/Gum mastic山达胶/山达脂/非洲松香/桧胶/方苞非洲柏胶/Gum sandarac虫胶/紫胶/虫胶腊/紫虫胶/漂白紫胶/Shellac柯柏胶/硬树脂/矿树脂/柯伯胶/柯帕树脂/Gum copal中性树胶/Neutral balsam植物凝胶/冷结树酯/结冷胶/吡喃葡萄糖醛酸与6-脱氧-L-吡喃甘露糖和D-吡喃葡萄糖乙酸酯的聚合物钙钾钠盐/Phytagel欢迎咨询:小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)试剂盒。 小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)试剂盒 Mouse membrane IgA,mIgA 试剂盒 小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)试剂盒 Mouse visfatin 试剂盒 小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)试剂盒 Mouse trypsinogen activation peptide,TAP 试剂盒 小鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)试剂盒 Mouse Bladder tumor antigen,BTA 试剂盒 小鼠胃蛋白酶(Pepsin)试剂盒 Mouse Pepsin 试剂盒 小鼠(HYD)试剂盒 Mouse Hydrocortisone,HYD 试剂盒 小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)试剂盒 Mouse ovalbumin specific IgE,OVA sIgE 试剂盒 小鼠C型钠尿肽(CNP)试剂盒 Mouse C-type natriuretic peptide,CNP 试剂盒 小鼠α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)试剂盒 Mouse α-glutathione S-transferases,α-GST 试剂盒 小鼠同型半胱氨酸(Hcy)试剂盒 Mouse Homocysteic acid,Hcy 试剂盒 小鼠糖皮质激素受体β(GR-β)试剂盒 Mouse glucocorticoid receptor-β,GR-β 试剂盒 小鼠糖皮质激素受体α(GR-α)试剂盒 Mouse glucocorticoid receptor-α,GR-α 试剂盒 小鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)试剂盒 Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ 试剂盒 小鼠己糖激酶(HK)试剂盒 Mouse Hexokinase,HK 试剂盒 小鼠丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1) 试剂盒 Mouse pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 试剂盒 小鼠糖原合成酶激酶(GSK)试剂盒 Mouse glycogen synthase kinase,GSK 试剂盒 小鼠高敏三碘甲状腺原氨酸(u-T3)试剂盒 Mouse Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 试剂盒 小鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)试剂盒 Mouse BH3 interacting domain death agonist,Bid 试剂盒 小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)试剂盒 Mouse Caspase-9,Casp-9 试剂盒 小鼠阿立新A(Orexin A)试剂盒 Mouse Orexin A 试剂盒
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)酶联免疫吸附测定试剂盒标本要求:1.液体内通用试剂盒2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。3.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存或根据存放,时间做相应温度调整,但应避免反复冻融.
人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)酶联免疫吸附测定试剂盒包含:
1.酶标仪(450nm检测波长滤光片,570nm或630nm校正波长滤光片) 。
2.洗板机(可调注液量,保证每孔洗液加至0.35ml而不溢出)。
3.超净工作台,生物安全柜,通风柜。
4.高精度单道加液器(量程为0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
5.高精度多道加液器(8道或12道,量程为50-300μl).
6.37℃恒温箱。
7.低温离心机。
8.电冰箱(4℃,-20℃,-86℃).
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说明书:欢迎来电索取
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Elisa试剂盒的原理ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
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