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ELISA实验代测北京小鼠表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA试剂盒说明书

ELISA实验代测北京小鼠表面膜免疫球蛋白A（mIgA）ELISA试剂盒说明书

英文名称：Mouse membrane IgA,mIgA ELISA Kit

ELISA试剂盒规格：48T/96T

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人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA试剂盒

编号	中文名称	英文名称	规格
FKW00638B	人表面膜免疫球蛋白A（mIgA）ELISA试剂盒	Human membrane IgA,mIgA ELISA Kit	96T

本产品科研领域使用，48T/96T两种规格,看到产品信息后,当天购买我公司产品,报名来源信息,可以享受七折优惠。

人表面膜免疫球蛋白A（mIgA）ELISA试剂盒的预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-9含量。

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人表面膜免疫球蛋白A（mIgA）ELISA试剂盒的相关产品有：

编号

规格

中文名称

英文名称

FA2443B	96T/48T	人白血病抑制因子受体（LIFR）ELISA试剂盒	Human leukemia inhibitory FActor receptor,LIFR ELISA KIT
FA2444B	96T/48T	人白三烯B4（LTB4）ELISA试剂盒	Human Leukotriene B4,LT-B4 ELISA KIT
FA2445B	96T/48T	人白介素8（IL-8/CXCL8）ELISA试剂盒	Human Interleukin 8,IL-8 ELISA KIT
FA2446B	96T/48T	人白介素6（IL-6）ELISA试剂盒	Human Interleukin 6,IL-6 ELISA KIT
FA2447B	96T/48T	人白介素4（IL-4）ELISA试剂盒	Human Interleukin 4,IL-4 ELISA KIT
FA2448B	96T/48T	人白介素3（IL-3）ELISA试剂盒	Human Interleukin 3,IL-3 ELISA KIT
FA2449B	96T/48T	人白介素1β （IL-1β）ELISA试剂盒	Human Interleukin 1β,IL-1β ELISA KIT
FA2450B	96T/48T	人肌钙蛋白Ⅰ（Tn-Ⅰ）ELISA试剂盒	Human Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA KIT
FA2451B	96T/48T	人白介素10（IL-10）ELISA试剂盒	Human Interleukin 10,IL-10 ELISA KIT
FA2452B	96T/48T	人白介素1（IL-1）ELISA试剂盒	Human Interleukin 1,IL-1 ELISA KIT
FA2453B	96T/48T	人S100B蛋白（S-100B）ELISA试剂盒	Human Soluble protein-100B,S-100B ELISA KIT
FA2454B	96T/48T	人S100蛋白（S-100）ELISA试剂盒	Human Soluble protein-100,S-100 ELISA KIT
FA2455B	96T/48T	人主要组织相容性复合体Ⅱ类（MHCⅡ/RLAⅡ）ELISA试剂盒	Human major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡ ELISA KIT
FA2456B	96T/48T	人凝血酶受体（TR）ELISA试剂盒	Human thrombin receptor,TR ELISA KIT
FA2457B	96T/48T	人可溶性P选择素（sP-selectin）ELISA试剂盒	Human soluble P-selectin,sP-selectin ELISA KIT
FA2458B	96T/48T	人Ⅰ型前胶原羧基端肽（PⅠCP）ELISA试剂盒	Human Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA KIT
FA2459B	96T/48T	人Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）ELISA试剂盒	Human Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA KIT
FA2460B	96T/48T	人Ⅱ型胶原（Col Ⅱ）ELISA试剂盒	Human Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA KIT

该公司产品分类：食品检测其他进口Elisa试剂盒进口大鼠Elisa试剂盒进口小鼠Elisa试剂盒进口人Elisa试剂盒进口Elisa试剂盒其他方法试剂盒病理耗材 PCR试剂盒系列培养基免疫化学产品细胞血清抗体猪elisa试剂盒试剂其他elisa试剂盒猫elisa试剂盒猴elisa试剂盒豚鼠elisa试剂盒

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〓武汉封口质量调整：《1、不同封口材料，需要确定不同的温度和封口速度，而温度与速度是相关的。在实际操作中必须协调试验，反复多次，调节不同温度和相应封口速度，达到满意为止。

《2、普通聚乙烯等单层塑料薄膜封口时，必须打开内机进行冷却。初次试验时，需慢慢地将温度逐步提高，应仔细选择合适温度及封口速度。如温度过高，则使薄膜融化粘在封口带上。如有以上情况应及时清除剥离，否则将影响封口质量。

《3、复合薄膜材料封口时，选择温度范围较单层薄膜要宽得多，不必开风机冷却。

《4、封口温度选择与封口速度有直接关系，同样材料，温度选择高时，速度可提高，速度低时，温度宜低些。薄膜厚度越厚，温度也需越高，反之也一样。

《5、封口传送带需经常清除积垢。加热区上、下两对铜块之间也需经常清除杂质，当这些积垢或杂质隔开加热区铜块之间距离时，将会明显影响封口强度和质量。

《6、花纹压力与封口质量关系密切，调整到花纹清晰即可，压力过高。将影响另部件寿命。压力过低花纹不清晰或封口强度降低。停机操作为了保护封口带使用寿命，在准备停机前，要求先将温度调节转盘退回到零位，这时温度指针开始缓慢下降，封口带应仍在运行，大约经过半小时，温度降到100度以下，方可关风机、总电源开关等。

〓武汉封口带更换方法：》1、拆下防卫罩，卸下导向橡胶带。

》2、旋转上冷却块与上加热块固定垫片，使冷却块加热块抬起。

》3、手推被动轮座e（向内方向），先取下下封口带。然后取下上封口带，再装上新带须序是先上后下。（注：封口带及易折断损坏，保存、装换时应注意勿使折叠及碰到锋利硬物）。

》4、调节拉力调节螺丝b，使封口带张力适度，以封口带运行时不打滑为准。（注：有时因加热块与冷却块上下之间留有污垢，使封口带运行阻力加大亦会使封口带打滑。应及时清除。）拉力过大，将影响封口带使用寿命。

》5、转放回垫片，开机试运转（暂勿加热）这时如果发现封口带有跑边现象，需调节螺丝c、d或c、d，一般情况旋紧c、c（松d，d）封口带向里跑，旋紧d、d（松c、c）封口带向外跑，（注：普通单层薄膜时，封口带偏外运行为宜，可防止薄膜在封口时直接触及加热块而导致产生破漏现象）

=====================================================================================武汉新日包装机械设备有限公司一直于包装设备的设计、制造与销售，是国内专业从事自动化包装机械的产品集研发、生产、销售、服务于一体的制造生产厂家，是包装协会会员单位其销售产品已通过ISO9001：2000体系认证,灌装封尾机及灌装机系列产品已通过CE认证。

茶叶包装机、茶叶分装机、茶叶烘干机、茶叶真空包装机、真空包装机、软管封尾机、灌装机、食用油灌装机、打码机、喷码机、打包机、封口机、热收缩机、旋盖机、锁盖机、折纸机、电磁感应封口机、枕式包装机、全自动包装机、颗粒包装机、粉剂粉末包装机、液体状的包装机等产品已在制药、日化、食品、农药、润滑油等行业广泛使用，部分产品远销欧洲、美洲、中东、东南亚等地区。产品的质量是同行之首，产品销遍国内各地，完善的售后服务，更是让您无后顾之忧。我公司本着以质量求生存，以信誉求发展; 客户的需要是我们的目标，客户的满意是我们的标准的企业宗旨，欢迎广大客商前来洽谈合作。

48T 96T人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒#品牌现货

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一、人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒实验原理

7月28日消息，据上海臻科午间发表：人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

二、人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒产品优势

1、优点明显产品具有灵敏度高、特异性强的特点，具有稳定的重复性，吸附性能好,空白值低，并适用于血清血浆组织匀浆等多种样本类型的检测，方法简单，操作方便，最大限度的节省了实验经费。

2、品质保障产品保证质量，出库质检把控严格，保障提供给客户的100%是优质产品，运输全程跟踪，公司承诺有任何质量问题包退换，诚信经营，合作共赢。

3、专业定制应市场需求公司特推出专业定制elisa试剂盒的服务，全程有专业的技术老师跟踪并和客户保持沟通，直到定制成功为止。

4、免费代测公司承诺订购ELISA试剂盒，享全程技术指导并可免费代测，为您分忧。全程有专业技术老师负责代测，收到样本一般7个工作日出结果。

5、服务周到设立售后服务中心，24小时及时响应，真正做到后顾无忧，不断完善服务体系。

三、人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒标本要求

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

五、人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒操作流程

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

六、人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

2.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

3.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5.底物请避光保存。

6.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

7.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

8.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

七、关于人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA检测试剂盒其他相关试剂

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人mIgA试剂盒96人份/48人份人表面膜免疫球蛋白A

企业单位：上海恒远ELISA试剂盒供应商产品单价：请来电询价（021-60517348）人表面膜免疫球蛋白A Human membrane IgA,mIgA ELISA KIT 产品规格：96人份/48人份保存条件：2-8℃产地：美国实验方法：酶联免疫法/酶免法（ELISA）检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA原理操作步骤方法一　用于检测未知抗原的双抗体夹心法:　　1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。　　2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。　　3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。　　4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。　　5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。　　6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O?D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔O?D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。　　方法二　用于检测未知抗体的间接法：　　　1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。2、次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,一遍用DDW（超纯水）洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。3.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。4.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。5.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O?D值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔O?D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

该公司产品分类：仓鼠ELISA试剂盒植物ELISA试剂盒酶联免疫学类分子学类生化学类代理品牌其它测试盒染色测试盒比色法测试盒终点法测试盒速率法测试盒其它方法测试盒免疫血清酶标亲合素及生物素化抗体酶标记抗体荧光素标记抗体纯化抗体免疫球蛋白抗原免疫化学品染色液试剂盒

人表面膜免疫球蛋白A（mIgA） elisa试剂盒厂家

产品名称：人表面膜免疫球蛋白A（mIgA） elisa试剂盒厂家

【规格】48T/96T

【所需标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等.

【库存状态】现货供应，订单生成，立即安排发货。

【使用范围】仅供科研使用，不得用于临床。

【产品用途】用于测定人血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。

上海润裕生物-中国老牌ELISA试剂盒供应商，免费代测，从标本收集、保存、预试验、实验、数据分析等全实验过程提供完整的技术指导。

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人表面膜免疫球蛋白A（mIgA） elisa试剂盒厂家上海润裕生物科技有限公司有专业的技术人员为您提供专业的操作问题分析与解答。包括售前的标本收集，使用过程中不清楚的地方，实验结束后的数据分析，有任何疑问，我们都会即时与您沟通。

我司ELISA试剂盒(酶联免疫分析试剂盒)提供免费代测服务，欢迎来电订购。我司专业供应各种属ELISA试剂盒产品，主要包括：人、大鼠、小鼠、羊、犬、猴、猪、牛、兔、豚鼠、植物ELISA试剂盒等ELISA试剂盒产品。如果您对我司其他产品感兴趣可通过以下方式咨询订购：

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人表面膜免疫球蛋白A（mIgA） elisa试剂盒厂家组成：

试剂盒组成 48孔配置 96孔配置保存

说明书 1份 1份

封板膜 2片（48） 2片（96）

密封袋 1个 1个

酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存

标准品 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存

标准品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

链霉亲和素-HRP 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

生物素标记抗体 0.5ml×1瓶 1 ml×1瓶 2-8℃保存

显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存

人表面膜免疫球蛋白A（mIgA） elisa试剂盒厂家样品收集、处理及保存方法：

1）血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2）血浆－－－－-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3）细胞上清液－－-1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4）组织匀浆－－－－-将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液

5）保存－－－－－－如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人表面膜免疫球蛋白A（mIgA） elisa试剂盒厂家我司ELISA试剂盒采用原装进口抗体，高品质Elisa试剂盒，专业的Elisa试剂盒厂家，品质保证，免费代测。其他相关产品欢迎选购：

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JEB-11413人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA试剂盒特异性强说明书

一、人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA试剂盒特异性强说明书实验原理

试剂盒采用双抗体夹心法，使用了两种高特异性的抗体测定靶蛋白，以TMB作为显色剂，显色的强度与样本中靶蛋白的量成正比。

二、试剂盒组成

1. 微孔板 (固相抗体) 96 well2. 标记抗体 (30倍浓缩，HRP标记抗体) 0.4 ml3. 标准品 0.5 ml × 24. EIA缓冲液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 30 ml5. 标记抗体稀释液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 12 ml6. 显色液 (TMB底物液) 15 ml7. 终止液 (1N硫酸) 12 ml8. 洗涤缓冲浓缩液 (40倍浓缩，0.05% Tween-20的磷酸缓冲液) 50 ml备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml

三、ELISA法的应用

1.免疫酶染色各种细胞内成分的定位。

2.研究抗酶抗体的合成。

3.显现微量的免疫沉淀反应。

4.定量检测体液中抗原或抗体成分。

四、性能1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%

五、检测范围和保存条件及有效期 1.试剂盒保存：2-8℃2．有效期：6个月

六、人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)elisa试剂盒特异性强说明书操作步骤1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。

6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。

7、温育：重复4的操作。

8、洗板：重复5的操作。

9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避光显色15min。

10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。

11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。

12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

七、样本处理

在收集标本前需有一个完整的计划，需要清楚要检测的成份是否足够稳定。ELISA检测提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。

八、人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA试剂盒特异性强说明书标本的采取和保存血清：是最常用于ELISA检测的一类样本，处理也比较简单。用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本，将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜，使血清析出。（最好将试管或离心管倾斜放置，使液面横截面增大，能使血清更大程度的析出。）4℃1000×g离心20min，仔细收集上清。建议将血清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。采血过程中应避免溶血，因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质，在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色，而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染，因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。血浆：用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本，标本采集后30min内4℃1000×g离心15min，取上清即血浆。将上清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

九、人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA试剂盒特异性强说明书操作中的洗涤

a)洗液不要溢出孔外，以免污染相邻的孔，特别是每次洗板的前两遍，若高浓度的孔污染了低浓度的孔或空白孔，其造成的交叉污染的孔是洗不掉的，背景肯定会增高。

b)特别注意：设计实验的时候要考虑实验孔的位置，保证甩掉洗液时，空白孔、低浓度孔或阴性对照组在上面或一侧或分开最好。同时注意甩掉洗液的动作翻转（从正上方旋转120－150度）要迅速、干脆。甩板不要手腕左右摇摆、旋转来甩液体！甩出后以直线方式补2－3次甩出液体。

c)用干净的滤纸，不要用卫生纸，因为细小粉尘或者碎屑容易吸附到孔底，导致洗板不干净，结果偏高或偏低，重复孔的数值也会相差很大。

d)每次拍板不要重复在一个地方拍，特别是洗去酶的步骤；拍板不宜过轻，否则拍不干净，拍板很用力不会对蛋白有什么影响。但注意不要太重，以至把板条给拍断。每次洗板后轻叩几下，最后一次一定要扣干净。

e)不能减少洗液体积、洗板时间和次数。洗板时间太短，洗板效果不佳。延长洗板时间和增加洗板次数可以使背景更干净。

十、关于操作过程中的提示：

⑴严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。

⑵加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。

(3)封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板”的出现。

(4)用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。

(5)合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

(7)显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。

(8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。

(9)应保证C清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至最低限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。

十一、计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

十二、人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA试剂盒特异性强说明书实验要点

洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种，过程如下：

　　（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液；b.用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去）；c.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短；d.吸干孔内液体。吸干应彻底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；e.重复操作c和d，洗涤3-4次（或按说明规定）。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间。

　　微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。

（2）流水冲洗式流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为彻底，且也简便、快速。已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳。

十三、人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA试剂盒特异性强说明书常见问题与答案

问：试验的标准曲线和测定的重复性差，这是什么原因造成的？

答：试验的标准曲线和测定的重复性差，这是典型的由测定操作引起的问题，常见原因如下：

a)可能原因：加样本及试剂量不准；孔间不一致；

解决方法：校正移液器，吸嘴要配套，装吸嘴时要紧密。

重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近；

重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性；

样品稀释前应充分混匀。

b)可能原因：加样过快，孔间发生污染；

解决方法：重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性；加样不要过快。

十四、关于我们

我们位于六朝古都江苏省南京市国家级白下高新技术产业园，是一家专业从事“自主产品研发生产、技术服务、知名品牌代理”的高新技术生物公司。以为生命科学工作者提供全方位高水平的产品及技术服务为经营宗旨，有别于众多国内企业单纯代理贸易的简单运营模式，强调高端技术的掌握和优化、自主产品的研发和生产，强调良好的售后服务和技术支持，努力打造中国乃至全球知名品牌。公司拥有高水平的技术研发团队，建立多种技术平台，产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学、药学等领域。公司拥有高水平的博士技术研发团队，多名技术骨干具有国外学习经历或跨国。公司同时聘请南京大学、东南大学、中国药科大学、南京中医药大学等高校重点实验室学科带头人担任公司技术顾问。我们拥有专业的客服团队提供最贴心的优质服务，以客户为中心第一时间解决客户的问题。我们与南京各大高校均有合作，提供专业免费代测和技术外包服务。

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