重组链球菌蛋白G检测试剂盒
使用说明书
一、试剂盒组成
名称 | 体积 | 描述 | 储存 |
10×样品稀释剂 | 30 ml | 使用前用蒸馏水稀释10倍,用于样品稀释和洗板 |
避光 2 ~ 8℃ |
TMB显色液A液 | 6 ml | 使用前A液和B液1:1混合,现配现用,避光,2 ~ 8℃保存。用于显色反应 | |
TMB显色液B液 | 6 ml | ||
终止液 | 6 ml | 用于终止显色反应 | |
人免疫球蛋白(IgG) | 300 μl | 50 mg/ml,非SPG柱纯化获得,用于标准曲线制作 | |
重组蛋白G(SPG) | 20 μl | 1 mg/ml,用于标准曲线制作 | |
酶标板 | 1 块 | 已包被抗体 | |
HRP标记抗体 | 30 μl | 二抗,25 μl用稀释剂稀释至10 ml | -20℃ |
二、简介
链球菌G蛋白(简称SPG)是G、C型链球菌细胞壁中的一种蛋白质,能特异性的同免疫球蛋白IgG分子的Fc段结合。广泛用于单克隆和多克隆抗体的纯化。
随着人们对免疫球蛋白质量越来越高,在使用SPG柱纯化免疫球蛋白时,从柱上脱落的SPG可能成为污染物。所以对洗脱样品进行脱落的SPG检测是有必要的。
在Elisa检测过程中,样品中脱落的SPG会与抗体形成SPG-IgG复合物,这种复合物使定量检测变得非常复杂,因此解除这种复合物的影响是准确测定SPG的关键。
本方法使用沸水浴处理样品,解除这种复合的影响,经过多项试验测试,煮沸后SPG不会沉淀,而IgG会产生大量沉淀失活,IgG沉淀会吸附少量SPG,所以样品煮沸后需要将沉淀打散均匀再离心,以释放少量被吸附的SPG,同时用含已知浓度IgG的SPG制作标准曲线,与样品相同处理,可以排除沉淀微量吸附SPG引起的误差。
本方法是利用“三层夹心”原理,已将一个SPG检测特制抗体包被在酶标板,在SPG结合后,用辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗体结合SPG,再用TMB显色底物显色。TMB在HRP的催化下发生转化为蓝色,并在酸的终止作用下最终转化为黄色,在一定的SPG浓度范围内,其颜色深浅与样品中SPG含量呈正比。用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度(OD值)。根据SPG浓度标准曲线计算出样品中含有SPG的量。
三、实验步骤
所有试剂使用前应先在室温(18 ~ 30℃)平衡30 min以上,恢复至室温。
3.1 样品稀释
样品需在pH 6 ~ 9的缓冲液中,或者用1×样品稀释剂适当稀释后pH应在此范围内。稀释后的抗体浓度应该小于5 mg/ml。
3.2 标准品稀释
标准品:取10 μl 1 mg/ml SPG标准品,用90 μl 1×样品稀释剂稀释10倍,为100 μg/ml;然后取50 μl 100 μl/ml SPG,加450 μl 1×样品稀释剂稀释10倍,为10 μg/ml;按此法逐步稀释为500 μl 100 ng/ml;然后再稀释至20、15、10、5、2、1、0.5 ng/ml,每样500 μl。
人IgG:取250 μl 50 μg/ml IgG溶液,加2.25 ml 1×样品稀释剂稀释10倍,为5 mg/ml;然后取2 ml 5 mg/ml IgG,加3 ml 1×样品稀释剂稀释至2 mg/ml。
混合:分别取20、15、10、5、2、1、0.5、0 ng/ml SPG标准品250 μl,与250 μl 2 mg/ml 人IgG混合。即为含1 mg/ml人IgG的10、7.5、5、2.5、1、0.5、0.25、0 ng/ml SPG标准品500 μl。
3.3 沸水浴预处理
将稀释好的样品和标准品在沸水浴中煮沸1 h(水应为沸腾状态),然后冷却,将沉淀打散,再12000 rpm离心2 min去除沉淀。根据需要,使用1×样品稀释剂稀释煮沸过的样品,做不同稀释度检测,稀释后的SPG应在试剂盒的检测范围(0.1 ~ 10 ng/ml,柱洗脱样品SPG残留一般为1 ~ 20 ng/mg)。
3.4 加样
样品和标准品每孔加100 μl,根据需要设置重复孔数,一般2个重复以上。加样时注意将样品加于酶标板孔底部,不要有气泡,加样尽量不触及孔壁。酶标板加上覆膜(或盖子,本试剂盒未提供),37℃湿盒温育1 h,用1×样品稀释剂洗板3次,拍干。
3.5 加HRP标记抗体
将HRP标记抗体用1×样品稀释剂稀释400倍,每孔加100 μl,需新鲜配置。酶标板加上覆膜,37℃湿盒温育1 h ,用洗涤液洗涤6次,拍干。
3.6 显色
将A液和B液1:1混合,现配现用,各孔加混合好TMB底物液100 μl,室温避光反应10 min。
3.7 终止
每孔加50 μl终止液终止反应。
3.8 读数
用酶标仪在450 nm波长处测定OD值。
四、结果结算
4.1 计算重复样的平均OD值。
4.2 以OD值为纵坐标,SPG浓度为横坐标,绘制标准曲线,获得线性公式。
以下数据仅做参考。每一次实验都应做一个标准曲线用于计算样品的值。
SPG(ng/ml) | 0 | 0.25 | 0.5 | 1 | 2.5 | 5 | 7.5 | 10 |
OD450nm | 0.064 | 0.079 | 0.0855 | 0.1165 | 0.2535 | 0.412 | 0.55 | 0.666 |
4.3 未知样品SPG浓度可由标准曲线查得,或根据计算公式计算(ng/ml)。
4.4 根据样品稀释度和抗体浓度计算每mg抗体中SPG的含量(ng/mg)。
狂犬病毒抗体定量检测试剂盒(酶联免疫法96T) 订货号:KY614
1.预包被板 | 48T/96T; | | 8. 终止液(6号液) | 1支; |
2.酶结合物原液 | 2支; | | 9. 临界对照品 | 1支; |
3.酶结合物稀释液 | 2支; | | 10.阴性对照品 | 1支; |
4.洗涤液(PBST干粉) | 1/2包; | | 10.不干胶膜 | 1/2片; |
5.底物(3号液) | 1支; | | 11.自封袋 | 1个; |
6.显色液(4号液) | 1支; | | 12.使用说明书 | 1份; |
7.样本稀释液(5号液) | 1支; | | | |
人原钙黏素1(PCDH1)ELISA分析检测试剂盒 英文名称:Human protocadherin 1,PCDH1 ELISA Kit存储方式:频繁使用时储存于2~8℃保鲜冷藏,较长时间不用时储存于-20℃,切勿冷冻。产品别名:人原钙黏素1(PCDH1)ELISA分析检测试剂盒 保存:2-8℃,有效期6个月规格:96T/48T产品名称:人原钙黏素1(PCDH1)ELISA分析检测试剂盒 英文名称:Human protocadherin 1,PCDH1 ELISA Kit规格96T/48T存储条件:2-8℃有效期:6个月特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床 人原钙黏素1(PCDH1)ELISA分析检测试剂盒的操作方法:
温馨提示:使用前,请彻底阅读说明书。测定试剂盒是基于经典酶联夹心技术原理,只能用于研究用途,不得用于医学诊断。人原钙黏素1(PCDH1)ELISA分析检测试剂盒有效期:6个月检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床人原钙黏素1(PCDH1)ELISA分析检测试剂盒检测类型:双抗体夹心法测抗原、双抗原夹心法测抗体、间接法测抗体、竞争法测抗体、竞争法测抗原、捕获包被法测抗体、ABS-ELISA法。公司常年代理美国DRG品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa试剂盒产品。
人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒进口/分装英文名称:Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA Kit 规格:96T/48T
人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒 进口/原装英文名称:Human Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit 规格:96T/48T
人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒 特价促销英文名称:Human Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA Kit 规格:96T/48T
人肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒特价供应英文名称:Human Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA Kit 规格:96T/48T
人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 进口/分装英文名称:Human Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit 规格:96T/48T
人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒进口/原装英文名称:Human Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit 规格:96T/48T
人转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒特价促销英文名称:Human transforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit规格:96T/48T
人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒特价供应英文名称:Human Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA Kit 规格:96T/48T
人可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒 进口/分装英文名称:Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand,sCD40L ELISA Kit 规格:96T/48T
人可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒 进口/原装英文名称:Human Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit 规格:96T/48T
人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA试剂盒特价促销英文名称:Human P-Selectin/CD62P/GMP140 ELISA Kit 规格:96T/48T
人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒特价供应英文名称:Human Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA Kit 规格:96T/48T
人血血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒进口/分装英文名称:Human Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA Kit 规格:96T/48T
人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒进口/原装英文名称:Human Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA Kit 规格:96T/48T
人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒特价促销英文名称:Human Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA Kit 规格:96T/48T
人L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒特价供应英文名称:Human L-Selectin ELISA Kit 规格:96T/48T
人白介素9(IL-9)ELISA试剂盒进口/分装英文名称:Human Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit 规格:96T/48T
人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒 进口/原装英文名称:Human Interleukin 8,IL-8 ELISA Kit 规格:96T/48T
人白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 特价促销英文名称:Human Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 规格:96T/48T
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试剂的取用规则:固体粉末试剂可用洁净的牛角勺取用。要取一定量的固体时,可把固体放在纸上或表面皿上在台秤上称量。要准确称量时,则用称量瓶在天平上进行称量。液体试剂常用量筒量取,量筒的容量为:5mL、10mL、50mL、500mL等数种,使用时要把量取的液体注入量筒中,使视线与量筒内液体凹面的最低处保持水平,然后读出量筒上的刻度,即得液体的体积。
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英文:Annexin V-PI apoptosis assay kit
中文:Annexin V 凋亡检测试剂盒
简称:Annexin V apoptosis assay kit
货号:abs50001A
规格:
abs50001A: Annexin V-PI apoptosis assay kit,25test,600元;
abs50001B: Annexin V-PI apoptosis assay kit,50test,1000元;
abs50001C: Annexin V-PI apoptosis assay kit,50test,1000元
形式:试剂盒
用途:细胞凋亡流式检测用
备注:仅限实验室研究使用 Research Use Only。
HT81001 Aldosterone EiAsy Aldosterone EiAsy 96孔/盒 ¥1440 HT81002 5a-Androstane-3a, 17b diol Glucuronide (3a-Diol G) EiAsy 5a-Androstane-3a, 17b diol Glucuronide (3a-Diol G) EiAsy 96孔/盒 ¥1640 HT81003 Androstenedione EiAsy Androstenedione EiAsy 96孔/盒 ¥1240 HT81004 Androstenedione Saliva EiAsy Androstenedione Saliva EiAsy 96孔/盒 ¥1560 HT81005 Anti-Thyroid Peroxidase Autoantibodies (Anti-TPO) EiAsy Anti-Thyroid Peroxidase Autoantibodies (Anti-TPO) EiAsy 96孔/盒 ¥1860 HT81006 Anti-Thyroglobulin Autoantibodies (Anti-TG) EiAsy Anti-Thyroglobulin Autoantibodies (Anti-TG) EiAsy 96孔/盒 ¥1840 HT81007 B2Microglobulin EiAsy B2Microglobulin EiAsy 96孔/盒 ¥1720 HT81008 C-Peptide EiAsy C-Peptide EiAsy 96孔/盒 ¥1320 HT81009 C-Reactive Protein (hs-CRP) EiAsy C-Reactive Protein (hs-CRP) EiAsy 96孔/盒 ¥1320 HT81010 Carcinoembryonic Antigen (CEA) EiAsy Carcinoembryonic Antigen (CEA) EiAsy 96孔/盒 ¥1640 HT81011 Cortisol EiAsy Cortisol EiAsy 96孔/盒 ¥1240 HT81012 Cortisol Saliva EiAsy Cortisol Saliva EiAsy 96孔/盒 ¥1560 HT81013 Chorionic Gonadotropin (hCG) EiAsy Chorionic Gonadotropin (hCG) EiAsy 96孔/盒 ¥1240 HT81014 Dehydroepiandrosterone Sulfate (DHEAS) EiAsy Dehydroepiandrosterone Sulfate (DHEAS) EiAsy 96孔/盒 ¥1240 HT81015 Dihydrotestosterone (DHT) EiAsy Dihydrotestosterone (DHT) EiAsy 96孔/盒 ¥1580 HT81016 Estradiol EiAsy Estradiol EiAsy 96孔/盒 ¥1240 HT81017 Estrone EiAsy Estrone EiAsy 96孔/盒 ¥1580 HT81018 Ferritin EiAsy Ferritin EiAsy 96孔/盒 ¥1240 HT81019 Follicle Stimulating Hormone (hFSH) EiAsy Follicle Stimulating Hormone (hFSH) EiAsy 96孔/盒 ¥1240 HT81020 Growth Hormone (hGH) EiAsy Growth Hormone (hGH) EiAsy 96孔/盒 ¥1240 HT81021 Insulin-Like Growth Factor Binding Protein-1 (IGFBP-1) EiAsy Insulin-Like Growth Factor Binding Protein-1 (IGFBP-1) EiAsy 96孔/盒 ¥1600 HT81022 Luteinizing Hormone (hLH) EiAsy Luteinizing Hormone (hLH) EiAsy 96孔/盒 ¥1200 HT81023 Leptin EiAsy Leptin EiAsy 96孔/盒 ¥1840 HT81024 Ovarian Cancer (CA125) EiAsy Ovarian Cancer (CA125) EiAsy 96孔/盒 ¥1600 HT81025 Pregnenolone EiAsy Pregnenolone EiAsy 96孔/盒 ¥1440 HT81026 Progesterone EiAsy Progesterone EiAsy 96孔/盒 ¥1160 HT81027 Progesterone Saliva EiAsy Progesterone Saliva EiAsy 96孔/盒 ¥1500 HT81028 Prolactin EiAsy Prolactin EiAsy 96孔/盒 ¥1200 HT81029 Prostatic Specific Antigen (Total) (tPSA) EiAsy Prostatic Specific Antigen (Total) (tPSA) EiAsy 96孔/盒 ¥1500 HT81030 Prostatic Specific Antigen (Free) (fPSA) EiAsy Prostatic Specific Antigen (Free) (fPSA) EiAsy 96孔/盒 ¥1600
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