人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA试剂盒等相关ELISA试剂盒产品说明书下载地址:http://www.shxysw.net/shxysw-Article/ 注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。 人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA试剂盒规格:96T/48T 产品保存条件:低温
产品范围:
人,小鼠,大鼠,猪,兔,其它动物细胞因子;细胞凋亡,活性多肽、自身抗体 ,血栓与止血,
骨代谢,肝纤维化,肿瘤,激素内分泌、自身抗体科研ELISA检测试剂盒
提供实验代测服务
特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月
预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
说明
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。需要而未提供的试剂和器材
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等
试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
标本的稀释原则:
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。最后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则:
临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:
临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取%
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA试剂盒价格,人ELISA试剂盒说明书ELISA的基本原理有三条:(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。酶联免疫(ELISA)使用试剂盒检测过程中值得关注的问题1.仪器质控 为使仪器保持最佳工作状态,应建立维护和校正仪器的标准操作程序(SOP),所要控制的仪器包括移液器(加样枪)、温箱、洗板机和酶标仪。◎移液器: ELISA加样量小(20-200μl),其准确性直接影响实验结果,利用称重法检查:低、中、高三个刻度分别吸取指示量的水,万分之一天平称重后计算吸量是否准确,一般应在±5%以内;◎恒温箱: 经常检查恒温箱温度计所示的温度和水中(或温箱内)实测温度是否一致,允许有±1℃的误差;◎洗板机: 每个厂家设置洗板后的残留液有各自的规定,一般不超过2μl;人工扣板时,垫纸不湿;定期检查管孔是否堵塞;◎酶标仪:经常维护其光学部分,防止滤光片霉变,定期检测校正,使其保持良好的工作性能。2. 酶标分析过程中的注意事项 样本的检测是基于抗原抗体的反应,根据标准曲线,判定样本最终的药物含量。它要求加样的准确性和洗板的一致性。在整个加样的过程中注意实验室温度的恒定,保证反应在试剂盒所示的温度下进行。 人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA试剂盒价格,人ELISA试剂盒说明书下面将ELISA法与免疫荧光(IFA)和放射免疫(RIA)的各自优缺点作一简要的比较(表4),供参考:表4:三种方法的优缺点比较:
方法种类 比较指标 | | | |
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ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。影响ELISA试剂盒试验效果常见问题原因分析及解决办法选择试剂时,应选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。加样可能碰到的问题:1、过长(特别是室内温度较高时);2、手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间;3、加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。.血清或血浆标本分离不好即进行加样。相应解决办法:1、标本为血清:最好将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。2、加样后及时放入孵箱。3、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。4、如果采用AT或其他全自动加样,最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。5、标本较多时,请分批操作。抗唾液腺导管组织抗体试剂盒(人)孵育可能碰到的问题:1、孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底;2、孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。 相应解决办法:1、贴封片或加盖;2、按说明步骤严格控制操作时间。洗板可能碰到的问题:1、采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉;2、采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差;3、反应板过多造成洗板等待时间长。相应解决办法:1、保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;2、合理安排,或多用几台洗板机。显色可能碰到的问题:1、显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;2、加显色剂时溅出孔外造成液体回流。相应解决办法:1、显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用;2、加样时保持显色剂不外流;3、A、B液应避免接触金属器械。抗唾液腺导管组织抗体试剂盒(人)终止可能碰到的问题:加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。相应解决办法:加终止液时应避免产生气泡。读板可能碰到的问题:读板时板底不清洁相应解决办法:应保证酶标板清洁。试验全过程:1、整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 2、实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。抗唾液腺导管组织抗体试剂盒(人)在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)(Elisa)酶联免疫试剂盒 用于医学诊断,使用前仔细阅读本说明书。
性状:盒装液体适应:科研实验有效期:半年保存温度:2-8℃规格:96T/48T
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Elisa试剂盒实验误差分为三种: 1、系统误差是指一系列测定结果与真值或靶值存在有同一倾向的误差,有明显的规律性,可在一定条件下重复出现,是可以通过质控预防和校正的。2、随机误差又称偶然误差,是一种偶然的、未能预料到的误差,是难以避免和校正的误差。检验工作中随机误差的分布符合正态分布规律。3、过失误差是人为的责任误差。通过加强实验室管理和开展质量控制工作是可以避免的。
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)(Elisa)酶联免疫试剂盒 相关产品信息:
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产品别名:人抗唾液腺导管组织抗体ELISA试剂盒
英文名称:Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA KIT
产品规格:96T/48T
价格:询价(010-57269780 QQ:1261299569 联系人:刘经理)待检样本:体液,血清,血浆,细胞培养上清液,尿液,组织匀浆,心房水标本等等。保存条件:2-8℃北京雅安达生物技术有限公司对外承揽试验:免疫组化, ,Tunel,Elisa,WB,原位杂交,比色法,HE染色,特染,图像分析,荧光欢迎咨询!010-57269780(北京雅安达生物技术有限公司)北京雅安达生物技术有限公司免费代测ELISA试剂盒一周内出结果
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免费代测 人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA Kit,人SDA检测试剂盒
【产品中文名称】 | 人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA Kit | |||
【产品英文名称】 | Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA Kit | |||
【保存温度】 | 2-8℃,避光保存 | |||
【产品规格】 | 96T/48T | |||
【有效期】 | 6个月 | |||
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该试剂盒适合检测血清,血浆,细胞上清,组织等样本,产品灵敏度高,具体见产品说明书. | ||||
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人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA Kit | ||||
【注意事项】 | ||||
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 | ||||
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 | ||||
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。 | ||||
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 | ||||
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值), | ||||
请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 | ||||
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA Kit | ||||
【实验中最可能出现问题】 | ||||
○一 所有孔未显色 ? 分析原因: | ||||
(1) 微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。 | ||||
(2)用错试剂。 | ||||
(3) 在操作中忘记加酶或抗体。 ? | ||||
解决办法: | ||||
(1) 检查洗板器械,比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。 | ||||
(2)在加样前,要看清瓶签。 | ||||
(3) 严格按说明书操作步骤进行实验,确保每步都到位。 | ||||
○二 所有孔显色偏低 ? 分析原因: | ||||
(1)微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。 | ||||
(2) 洗板不干净。 | ||||
(3) 抗体污染了酶结合物等其它试剂。 | ||||
(4)温度没达到要求。 | ||||
(5) 每孔加入的试剂量低于说明书要求量。 ? | ||||
2.解决办法: | ||||
(1)手工加蒸馏水洗板时,要避免吸头接触微孔,常更换新的蒸馏水。 | ||||
(2) 洗板时要确保每孔都注满蒸馏水(约400ul),且至少洗板五次。 | ||||
(3)严格按说明书要求操作,每次取样要更换吸头。 | ||||
(4) 控制孵育温度在25℃。 | ||||
(5) 加样器吸头安放牢固避免吸样不足,加样时务必将吸头内液体打尽。 | ||||
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)ELISA Kit | ||||
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英文名称:Humansalivaryductautoantibody,SDAELISA试剂盒
Elisa试剂盒操作方法:双抗体夹心法/间接法,比较常用的是双抗体夹心法。
在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:1.固相载体的选择;2.包被抗体(或抗原)的选择;3.酶标记抗体工作浓度的选择;4.酶的底物及供氢体的选择.
用途:科研实验等领域科学研究,不得用于临床诊断.
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好.
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