人抗唾液腺导管组织抗体(SDA) ELISA检测试剂盒等ELISA检测试剂盒基本属性:特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床 96T使用方法:96T ELISA检测试剂盒可用作标本90个,标准曲线6个或者用本公司产品作标本94个,标准对照2个。48T使用方法:48T ELISA检测试剂盒可用作标本46个,标准曲线6个或者用本公司产品作标本47个,标准对照1个。ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA) ELISA检测试剂盒等上海双赢生物科技有限公司elisa检测试剂盒试剂盒优点多多,更加方便我们的科研学者进行科学实验,是科研实验的最佳伙伴。 (1)、高效、灵敏、特异的抗体; (2)、稳定的重复性和可靠性; (3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体; (4)、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型; (5)、节省实验经费。
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA) ELISA检测试剂盒等上海双赢生物科技有限公司ELISA检测试剂盒技术原理: (1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。 (2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。 (3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。 (4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。 (5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。 (6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术
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SYIN-(Rat)-02781 | 大鼠骨桥素(OPN)ELISA检测试剂盒 | Rat Osteopontin,OPN ELISA检测试剂盒 | 规格:96T/48T |
规格:96T/48T
货期:2~3天
保存温度:2-8℃
用途:用于测定兔血清、血浆、组织及相关液体样本中的含量或活性。
有效期:12个月(-20℃)/6个月(2-8℃)。
检测波长:450nm。
所需样本体积:50-100ul。
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)elisa试剂盒检测目的:用于测定血清、血浆及相关液体等样本(如:血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本)。
供应种属:人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、羊、鸡、鸭、植物等ELISA试剂盒。
标本类型:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等,注:标本必须为液体,不含沉淀。
ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
温馨提示:将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)elisa试剂盒等润裕生物elisa试剂盒产品优势:
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置。
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)elisa试剂盒等润裕生物ELISA试剂盒产品,原装ELISA试剂盒以及各类国产ELISA试剂盒产品8折优惠热销中,欢迎广大科研学者前来选购:RY-(elisa)-02334大鼠天冬氨酸氨基转移酶(AST)Rat Aspartate aminotransferase,AST Elisa Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02335大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒Rat associated protein A,SP-A ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02336大鼠肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)Rat associated protein B,SP-B ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02337大鼠肺表面活性物质相关蛋白c(SP-c)Rat associated protein C,SP-C ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02338大鼠叠氮胸苷(AZT)ELISA试剂盒Rat Azidothymidine,AZT ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02339大鼠碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)ELISA试剂盒Rat basic fibroblast growth factor 4,bFGF-4 ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02340大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)ELISA试剂盒Rat basic fibroblast growth factor 6,bFGF-6 ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02341大鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA试剂盒Rat basic fibroblast growth factor 9,bFGF-9 ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02342大鼠碱性成纤维生长因子(bFGF)ELISA试剂盒Rat basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit 规格:96T/48TRY-(elisa)-02343大鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒Rat B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit 规格:96T/48TRY-(elisa)-02344大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒Rat Bcl-2 associated X protein,Bax ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02345大鼠β细胞素(BTC)ELISA试剂盒 Rat beta cellulin,BTC ELISA Kit 规格:96T/48TRY-(elisa)-02346大鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒Rat Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02347大鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒Rat Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02348大鼠β羟丁酸(βOHB)ELISA试剂盒Rat Beta-HydroRYbutyric Acid,β-OHB ELISA Kit 规格:96T/48TRY-(elisa)-02349大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA试剂盒Rat beta-site APP-cleaving enzyme 2,BACE2 ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02350大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒Rat BH3 interacting domain death agonist,Bid ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02351大鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒Rat Big Endothelin,Big ET ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02352大鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒Rat Big Endothelin,Big ET ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02353大鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA试剂盒Rat Bladder tumor antigen,BTA ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02354大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)ELISA试剂盒Rat bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02355大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02356大鼠骨形成蛋白-2(BMP-2)Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02357大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒Rat Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02358大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒Rat Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02359大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒Rat Bone morphogenetic protein 6,BMP-6 ELISA Kit 规格:96T/48TRY-(elisa)-02360大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒Rat Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit 规格:96T/48TRY-(elisa)-02361大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)ELISA试剂盒Rat Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02362大鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒Rat Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit规格:96T/48TRY-(elisa)-02363大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒Rat bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit规格:96T/48T
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)elisa免疫组化试剂盒英文名称:Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA Kit常用搜索名称:人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)elisa免疫组化试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验分析方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素, 已广泛应用在免疫学科研实验的各领域中。
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 发货地 |
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)elisa免疫组化试剂盒 | Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA Kit | 48T/96T | 上海 |
产品名称:人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)elisa免疫组化试剂盒
英文名称:Human salivary duct autoantibody,SDA ELISA Kit
产品规格:96T/48T
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:6个月,所有试剂盒均提供最新批次。
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)elisa免疫组化试剂盒的基本原理:
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)elisa免疫组化试剂盒注意事项:
1. 从-20℃取出的试剂盒,最好在4℃解冻过夜。盒内每一瓶解冻的溶液在开启瓶盖之前都要轻轻摇匀,避免解冻时出现的分层,否则会出现浓度不均一的现象。
2. 开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
3. 配制各种试剂时,切记混匀!
4. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
5. 建议所有标准品、样本都做双份检测。
6. 要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活!
7. 为免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。
我们承诺,如果您购买的产品有任何质量问题,我们无条件包退、包换、包运费!请新老客户放心订购!
大鼠C-Fos 英文名称:Erythrosine规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠降钙素基因相关肽(rat CGRP)英文名称:Carmine规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠软骨寡聚基质蛋白(rat COMP)英文名称:Auramine 0规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠Copeptin(rat Copeptin)英文名称:Pulsatilla Saponin B4规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠环氧化酶-2(rat COX-2)英文名称:5, 7, 3, 4, 5- five methoxy flavone规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠心肌营养素-1(rat CT-1)英文名称:20 (S) - ginsenoside F2规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠心肌钙蛋白T(rat cTnT)英文名称:20 (S) - ginsenoside F1规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠CXCR3(rat CXCR-3)英文名称:Ginkgo acid C15:1规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠Fusin(rat CXCR4)英文名称:Aucubin规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠胱抑素C(rat Cystatin C)英文名称:11- keto beta boswellic acid and acetyl规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠二胺氧化酶(rat DAO)英文名称:Two phenyl heptane A规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠D-乳酸(rat D-LAC)英文名称:20 (S) - protopanaxatriol three alcohol规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠多巴胺(rat Dopamine)英文名称:Mogroside V规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠二肽基肽酶IV(rat DPP-4)英文名称:(R, S) - goitrin规格:20mg保存:-20℃,避光
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(rat DR-4)英文名称:Pipecolic acid规格:20mg保存:-20℃,避光石菖蒲 Acorus tatarinowii SchottAsarone5273-86-9C12H16O3≥98%
石菖蒲 Acorus tatarinowii SchottAsarylaldehyde14374-62-0C24H32N4O6S≥98%
升麻Cimicifuga foetidaActein18642-44-9C37H56O11≥98.5%
升麻Cimicifuga foetidaAngelicain49624-66-0C15H16O6≥97%
升麻Cimicifuga foetidaCimiside B152685-91-1C40H64O13≥97%
升麻Cimicifuga foetidaKhellin82-02-0C14H12O5≥96%
升麻Cimicifuga foetidaNorkhellol4439-68-3C12H8O5≥97%
升麻Cimicifuga foetidaprim-O-Glucosylangelicain85889-15-2C21H26O11≥95%
升麻Cimicifuga foetidaVisnagin82-57-5C13H10O4≥95%
升麻 Cimicifuga foetida L.Isoferulic acid537-73-5C10H10O4≥98%
升麻 Cimicfuga goetida L.Cimifugin37921-38-3C16H18O6≥98%
深山紫堇 Corydalis pallida(Thunb.)Pers.Cryptopine482-74-6C21H23NO5≥98%
麝香草 Thymus vulgaris L.Caffeic acid331-39-5C9H8O4≥98%
人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)elisa免疫组化试剂盒麝香草 Thymus vulgaris L.3-Methylcyclopentadecanone541-91-3C16H30O≥98%
麝香草 Thymus vulgaris L.Thymol89-83-8C10H14O≥98%
射干Belamcanda chinensis (L.) DCIridin491-74-7C24H26O13≥98%
包装 | 运输方式 |
内层无菌自封袋、专用防压泡沫盒、外层防压保温气泡袋、说明书。 | 干冰或者活体细胞运输,保证细胞运输中的存活率。 |
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断,具体说明书请联系客服索取,本说明书是通用模板,有些数据不准确.产品规格48T/96T 国产/RD进口分装/TSZ进口原装工作原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
注意事项1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
性能特点1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。2. 灵敏度:最低检测浓度小于(参考说明书)3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。6. 有效期:6个月
免责声明1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。本品为科研试剂,只对单位实验室学校等正规用途出售。如需资料请向客服索取!企业网站:www.yuduobio.com数十万产品随亲挑选,正规生物公司,可开具正规机打发票。发票需加6个点。
公司介绍
上海羽朵生物科技有限公司生产销售elisa试剂盒、动物血清、血浆、全血、抗原抗体、金标试剂盒检测卡、抗血清、生物试剂、培养基、实验室仪器耗材、化学试剂、生物制品、标准品、对照品、生化免疫制品、免疫亲和柱、菌株、质粒、室内质控品、细胞、冰袋、代理进口产品等量大从优!牛血清白蛋白(BSA)1kg 3000元,纯度为>99%可定做各种浓度的绵羊红细胞,兔血红细胞,鸡血红细胞。出售补体实验所需的溶血素,试剂盒,蛇毒因子,黄曲霉毒素B1标准品,以色列进口原装,纯度99.8%,1-100mg规格齐全,随货带防伪证书,送检测试纸。黄曲霉毒素B1标准品,新加坡进口,纯度>99%,1-100mg规格齐全,随货带防伪证书,送检测试纸。另出售环氧化苯并芘标准品,纯度99.9%,100mg,500mg,1g三种规格现货促销。。。动物血清系列:标准胎牛血清、特级胎牛血清、标准新生牛血清、特级新生牛血清、优级新生牛血清、标准马血清、特级马血清、山羊血清、绵羊血清、兔血清、鸡血清、大牛血清、小牛血清、猪血清、狗血清、驴血清、豚鼠血清、大鼠血清、小鼠血清、巴比西鼠血清各种动物全血:抗凝全血.脱纤维全血.脱纤维裂解裂解血.抗凝裂解血.各种动物血浆:(胎牛血清、新生牛血浆、大牛血浆、小牛血浆、绵羊血浆、山羊血浆、猪血浆、驴血浆、马血浆、、狗血浆、兔血浆、大鼠血浆、小鼠血浆、豚鼠血浆)
出售各种真菌毒素类标准品:3-4’苯并芘,环氧化苯并芘、黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1,M2、脱氧雪腐镰刀菌烯酮(DON呕吐毒素)、3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-A-DON)、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-A-DON)、雪腐镰刀菌烯醇(NIV)、伏马毒素B1B2、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮、T2毒素、HT2毒素、桔青霉素/桔霉素、棒曲霉素/展青霉素、杂色曲霉素、黄曲霉毒素混标液体 (SIGMA)、黄曲霉毒素混标液体 (FERMENTEK)、黄曲霉毒素M1液体标品(10ug/ml)、黄曲霉毒素M1液体标品(0.5ug/ml)、赭曲霉毒素A液体标品、 黄曲霉毒素B1液体标品
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货号: XY999024P15
北沙参探针法PCR鉴定试剂盒Radix glehniae产品及特点:它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 引物和探针经过优化,灵敏性高。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. 特异性高,引物是根据北沙参高度保守区设计,不会跟其他病毒 DNA发生交叉反应。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的探针法荧光定量 PCR 反应。
6. 本产品只能用于科研。
规格及成分:
编号 | 成分 | 规格 |
试剂一 | 2×Probe qPCR MagicMix | 500 μL(本色盖) |
试剂二 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) |
试剂三 | 北沙参qPCR引物混合液 | 100 μL(白盖) |
试剂四 | 北沙参qPCR探针 | 50 μL(棕色管) |
试剂五 | 北沙参探针法qPCR阳性对照(1×10E8拷贝/μL) | 50 μL(红盖) |
使用手册 | 1 份 |
运输及保存: 低温运输,-20℃保存,保存期限为 12 个月。
自备试剂: 样品 RNA。
使用方法 一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的 DNA 片段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液,用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 RNA 的制备:
7. 如果有 N 个样品,设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为 NC。
8. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数 DNA 提取试剂盒兼容。
三、Probe qRT-PCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行):
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于 PCR 阳性对照(用第 4 号管的阳性对照稀释液做模板)。下面只以定量分析为例描述操作步骤。
10. 在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加):
成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照管 | 标准曲线样品管(2-7管) |
2×Probe qPCR MagicMix | 10μL | 10μL | 各10μL |
北沙参qPCR探针 | 1μL | 1μL | 各1μL |
北沙参探针法qPCR引物混合液 | 2μL | 2μL | 各2μL |
N+2个待测DNA模板 | 7μL | -- | -- |
超纯水 | -- | 7μL | -- |
第7步所得标准曲线样品稀释液(2-7号) | -- | -- | 各7μL(2号样到2号管,3号样到3号管…) |
11.盖上盖子后上机,按下面参数进行PCR:
过程 | 温度 | 时间 |
预变性 | 95℃ | 3 min |
PCR 反应(40 个循环) | 95℃ | 15 sec |
60℃ | 1 min(采集FAM通道的荧光信号) |
四、数据处理:
12. 如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 RNA浓度的 log 值,再推算出其浓度。
13. 如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct 值应该小于或等于 30。对待测样品,如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性,如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间,则重复一次。若重复结果 Ct值小于 40,扩增曲线有明显起峰,该样本判断为阳性,否则为阴性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。