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现货大鼠极低密度脂蛋白试剂盒使用方法

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文件大小：23kb

上传时间：2014/10/27 10:39:18

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上 传 者：杰辉生物（北京）科技发展有限公司

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现货大鼠极低密度脂蛋白试剂盒使用方法

使用目的：

本大鼠极低密度脂蛋白试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中极低密度脂蛋白（VLDL）含量。

操作步骤

1.标准品的稀释：本大鼠极低密度脂蛋白试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

120μg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

60μg/ml

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

30μg/ml

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

15μg/ml

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

7.5μg/ml

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.配液：大鼠极低密度脂蛋白将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

大鼠极低密度脂蛋白操作程序总结：

1.准备试剂，样品和标准品

2.加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟

3.洗板5次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟

4.洗板5次，加入显色液A、B，37℃反应10分钟

5.加入终止液

6.15分钟之内度OD值

7.计算

计算

大鼠极低密度脂蛋白以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

 

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