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兔子ALD检测试剂盒,兔醛固酮（ALD）ELISA试剂盒操作手册
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上传时间：2014/6/27 10:33:01
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上 传 者：杰辉生物（北京）科技发展有限公司
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兔子ALD检测试剂盒,兔醛固酮（ALD）elisa试剂盒操作手册
兔醛固酮(ALD)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
10pg/ml-320pg/ml
使用目的：
本试剂盒用于测定兔血清、血浆及相关液体样本中醛固酮(ALD)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔醛固酮(ALD)水平。兔醛固酮(ALD)ELISA试剂盒用纯化的兔醛固酮(ALD)
抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入醛固酮(ALD)，再与HRP
标记的醛固酮(ALD)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物
TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜
色的深浅和样品中的醛固酮(ALD)呈正相关。兔醛固酮(ALD)ELISA试剂盒用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），
通过标准曲线计算样品中兔醛固酮(ALD)浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（640pg/ml） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，兔醛固酮(ALD)ELISA试剂盒提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
320pg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
160pg/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
80pg/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
40pg/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
20pg/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 兔醛固酮(ALD)ELISA试剂盒洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此
重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计
算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 兔醛固酮(ALD)ELISA试剂盒封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．兔醛固酮(ALD)ELISA试剂盒有效期：6 个月
大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA试剂盒 Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA试剂盒
大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA试剂盒 Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA试剂盒
大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA试剂盒 Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA试剂盒
大鼠载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒 Rat Apolipoprotein H,Apo-H ELISA试剂盒
大鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒 Rat Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA试剂盒
大鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒 Rat adrenomedullin,ADM ELISA试剂盒
大鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒 Rat Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA试剂盒
大鼠钙/钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA试剂盒 Rat calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ,CAMK 2 ELISA试剂盒
大鼠肝脂酶(HL)ELISA试剂盒 Rat hepatic lipase,HL ELISA试剂盒
大鼠烟碱型乙酰胆碱受体(N-AChR)ELISA试剂盒 Rat nicotinic acetylcholine receptor,N-AChR ELISA试剂盒
大鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)ELISA试剂盒 Rat muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA试剂盒
大鼠活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒 Rat activated protein C,APC ELISA试剂盒
大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA试剂盒 Rat galanin,GAL ELISA试剂盒
大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA试剂盒 Rat α-Glucosidase,a-Glu ELISA试剂盒
大鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒 Rat osteoclast differentiation factor,ODF ELISA试剂盒
大鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒 Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA试剂盒
大鼠钩端螺旋体IgG(Lep IgG)ELISA试剂盒 Rat Leptospira IgG,Lep IgG ELISA试剂盒
大鼠热休克因子1(HSF1)ELISA试剂盒 Rat Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA试剂盒
大鼠β羟丁酸(βOHB)ELISA试剂盒 Rat Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA试剂盒
大鼠细胞色素P450(CYP450)ELISA试剂盒 Rat cytochrome P450,CYP450 ELISA试剂盒
大鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA试剂盒 Rat growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA试剂盒
大鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA试剂盒 Rat Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA试剂盒
大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒 Rat Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA试剂盒
大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 Rat transforming growth factorsβ2,TGFβ2 ELISA试剂盒
大鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA试剂盒 Rat cytochrome P450 2E1,CYP2E1 ELISA试剂盒
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大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒 Rat peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA试剂盒
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