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血清使用的注意事项
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上 传 者：杰辉生物（北京）科技发展有限公司
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血清使用的注意事项
1、血清必须贮存-20℃，如存放于4℃，请勿超过两周，对于某些单位一次无法用完一瓶，可在无菌条件下将其40-45ml分装于无菌50ml离心管中（或血清瓶中），由于血清解冻时体积会增加10％，必须预留此膨胀体积的空间，否则易发生污染或容器冻裂的情形。
2、一般公司所提供的血清一般为100ml和500ml装量，因此建议在使用中宜采取逐步解冻的方法解冻血清：-20℃→4℃冰箱或冷库溶解24小时→室温下全溶后再分装，一般以50 ml无菌离心管中分装40-45ml。使用过程中要特别注意，必须规则地将血清摇晃均匀，小心勿造成气泡，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由-20℃放置至37℃环境下解冻，因为温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而产生沉淀。
3、血清的灭活（heat-inactivation）一般是指56℃，30分钟水浴加热已完全解冻的血清，加热过程中必须规则地摇晃均匀。此处理的目的是使血清中的补体成分（complement）去活化。但是，经过灭活处理的血清会因而造成沉淀的显著增多，且会影响血清的品质。所以，有的公司所生的细胞培养用牛血清不做灭活处理，由客户自行选择。而诊断试剂用血清在除菌过滤前进行过灭活处理。
4、在使用血清的时候，勿将血清留置于37℃太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分会因而受到破坏，影响血清的品质。
5、一般我们在使用过程中是先过滤培养基，再加血清，勿直接过滤血清。
6、血清的沉淀物：
（1）凝絮物：其产生的原因有多种，但普遍的原因是血清中的脂蛋白（lipoprotein）变形及解冻后血清中存在的纤维蛋白（fibrin）造成，这些凝絮沉淀物不会影响血清本身的品质。除非必须，如果您想减少这些沉淀物，建议可用离心3000rpm，5min去除，或离心后取上清液加入培养基中一起除菌过滤。
（2）显微镜下观察“小黑点”，通常经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为是血清遭受污染（如黑胶虫），而将血清放置在37℃中欲培养此“微生物”，但37℃环境下，又会使此沉淀物增多，更会误认为微生物的增殖，但以培养细菌的培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点不会影响细胞的生长。
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