免疫球蛋白E（IgE）检测试剂盒
（德国DRG：EIA1788）
1、应用范围
此试剂盒可用于人血清中免疫球蛋白E（IgE）的定量检测。
2、前言说明
有遗传性过敏疾病（如遗传性的过敏性哮喘、遗传性的过敏性皮炎和花粉热）的病人一般都会表现出血液总IgE浓度明显升高。IgE是同样也是一种反应抗体。一般说来，IgE浓度的升高表明可能会出现IgE介导的超敏反应，从而导致过敏反应。寄生虫侵染（如十二指肠虫）或曲霉病期间出现某些临床紊乱也会出现高浓度的血清IgE。以下疾病病例的IgE水平会降低：丙种免疫球蛋白过少症、自身免疫性疾病、溃疡性结膜炎、肝炎、癌症和疟疾。脐带血或血清IgE在评价儿童预期过敏情况中具有重要的诊断价值。病人血清IgE的浓度还跟过敏反应的程度和病人感染的过敏反应数量有关。非过敏性正常个体的IgE浓度变化范围非常宽，在童年阶段逐步稳定上升并在15到20岁时大到最高水平，之后直到60岁都维持在那水平，60岁后便稍微有所下降。
3、实验原理
IgE定量检测试剂盒采用酶免反应的原理。此检测系统利用了一种单克隆的抗IgE抗体（固相包被在微孔中）和一种辣根过氧酶标记的羊抗IgE抗体。将样品（血清）加入到IgE抗体包被的微孔中，与零缓冲液一起在室温下温育30分钟。如果样品中有人IgE，此抗体就会结合到微孔中的抗体上。之后洗板除去残余的检测样品，再加入辣根过氧酶标记的IgE抗体。此酶联物可免疫性的结果到微孔中的IgE上，从而使IgE分子被夹在固相抗体和酶联抗体之间。室温下温育30分钟，用水洗板除去未结合的酶标抗体。再加入TMB底物液并在室温下温育20min，结果溶液变成蓝色。加入终止液终止显色反应，此时溶液有蓝色变成黄色，之后在450nm处读取OD值。样品中IgE的浓度与溶液所显示的颜色强度成正比。
4、试剂盒成分
1） 单克隆抗IgE包被的96孔包被板。
2） 零缓冲液，13ml
3） 酶联物，18ml
4） IgE参考标准品，内含0，10，50，100，400和800IU/ml的IgE。
5） TMB底物液，11ml
6） 终止液，1N的HCl，11ml
5、实验所需材料
1） 移液器，20ul、100ul和150ul
2） 蒸馏水
3） 一次性取样吸头
4） 旋涡混合器
5） 吸水纸
6） 可在450nm处读数的酶标仪。
7） 坐标纸
6、样品的采集与准备
血清应当用适当的医学方法从全血样品中获取。此试剂盒仅能使用无任何添加剂的血清样品。
第3年
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