【产品名称】
通用名称:C-肽检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:C-Peptide ELISA
【产品规格】
96T
【预期用途】
该试剂盒用于人类血清、血浆以及尿液中C肽的定量检测。
【前言简介】
胰岛β细胞分泌一种由86个氨基酸组成的多肽,称为胰岛素原。胰岛素是胰岛素原的一部分,分子量6000.胰岛素原随后在酶促反应中裂开,释放出来胰岛素到循环中去。裂解剩下的部分,分子量为3000,被称为连结(“C”)多肽。之所以这样命名,是因为它在胰岛素原分子中连结胰岛素的A链以及B链。
人类C肽,是一个含31个氨基酸的残基,分子量接近3000道尔顿。C肽没有代谢功能。然而C肽与胰岛素是等量分泌的,因此C肽的检测就是胰岛素的检测。这就是为什么临床上检测C肽的原因。不仅如此,检测C肽比检测胰岛素还有一些优点。
C肽在循环中的半衰期比胰岛素要长5倍,相比之下胰岛素的水平变化太快,C肽水平则要稳定的多。同样,由于C肽的代谢惰性,它在外周静脉血中的含量水平要比胰岛素高上5-6倍。还有的特点就是C太检测能够区分出內源性及外源性的胰岛素。因此,当胰岛素减少(胰岛素依赖性糖尿病)或者被抑制(由于外源胰岛素)的时候,C肽水平降低;而当有胰岛素瘤时,胰岛β细胞活性增强,C肽水平则会升高。C肽检测也被用于评估葡萄糖耐受以及格列苯脲检测。C肽检测用于内源性胰岛素分泌的检测由于外源性胰岛素检测。既可以用于血液检测,也可用于尿液。随着技术的发展,现在能检测出相当低水平的C肽。
C-肽ELISA试剂盒的临床应用
1) 接受了胰岛素治疗的糖尿病患者剩余β-细胞的功能评价
2) I型糖尿病患者缓解阶段的检测与监控
3) 作为I型糖尿病(胰岛素依赖性)和II型糖尿病(非胰岛素依赖性)鉴别诊断的辅助工具
4) 胰岛素引起的假低血糖症的诊断
5) 辅助胰岛素瘤的诊断(胰岛素抑制实验)
6) 用于检测糖尿病孕妇妊娠成功的预后指数
7) 肝病患者胰岛素分泌的评价
8) 胰腺切除术的监测
【检测原理】
DRG公司C-肽ELISA试剂盒是以竞争原理为基础。样品中存在的未知含量的C-肽和已知浓度的C-肽联结物相互竞争结合到被微孔中抗小鼠抗体连结的鼠抗C肽抗体上。在第二步中酶复合物结合到C-肽联结物上。没有结合的酶复合物被冲洗下来。加入底物溶液后,样本中的 C-肽浓度和测得的光密度成反比例。
【试剂盒组成成分】
1) 微孔板,96(孔),微孔中包被了抗小鼠抗体。
2) C–肽联结物,14ml。内含生物素化C-肽和稳定缓冲液。
3) 酶复合物,14ml,内含辣根过氧化物酶
4) 抗血清,7ml 即用型 含鼠单克隆抗C肽抗体
5) 标准品系列,冻干粉,6支,0-16ng/ml(具体浓度请见试剂瓶标签)
6) 样品稀释液,3ml。
7) 底物液,TMB,14ml
8) 终止液,0.5M的H2SO4,14ml。
9) 浓缩冼涤液,40倍浓缩,30ml。
所需材料(未提供)
1) 酶标仪
2) 移液器,100;200和1000μl
3) 标准冰箱
4) 吸水纸
5) 去离子水
【储存条件】
当贮存在28℃下,未打开的试剂在有效期内均有效。不要使用过期试剂。半标准品配制好后,所有剩余的标准品必须冷藏于28℃的环境下。要更长时间的贮存,可将重新配制好的标准品冻存于-20℃的环境下。C- 肽生物素联结物、酶复合物、底物溶液、洗涤液和零标准品必须冷藏于28℃的环境下。微孔反应板也必须冷藏于28℃的环境下。
【样本要求】
A. 血清和血浆样本
注意静脉取血一般的预防措施。样本不必做特殊的预处理。样本可以在28℃ 下贮存24小时,要保存更长的时间,以可将样品冻存于–20℃或更低温度的环境下。不用溶血或脂血样品。C-肽的含量高于标准曲线的最高值的样品应用零校准品进行稀释。
B. 尿液样本
1) 24小时内排泄出的尿液总量应收集和混合在单独的容器中。
2) 注意:样品在收集后应贮存在2~8℃下(36小时内稳定),并且记录下尿液的总体积。
3) 充分混合样品。离心样本至澄清。
4) 实验样本用样品稀释液按1:20进行稀释。