维生素B12检测试剂盒
美国cortez 编号1739-8
前言
维生素B12是一种微量元素,是重要的生物螯合物. 基本单位为1个含钴作为中心原子. 钴啉环平面上方钴离子与5，6-2甲基苯基咪唑的N-3相连. 维生素B12被小肠吸收后会形成稳定的复合物, 存储在胃液中称为内因子. 缺少维生素B12会间接导致恶性贫血. 这种疾病并不是由于维生素B12供给不足而引起的,而是由于内因子的缺乏. 恶性贫血能通过注射高剂量的维生素B12治愈.
可通过微生物学,HPLC,色谱法,在一定的时间借助特定的仪器对维生素B12的存在进行检测. 本试剂盒,相比于传统的微生物检测方法,能更快速(2.5-4小时,包括样品预处理)的用于维生素食物中维生素B12的定量检测.
实验原理
Diagnostic Automation公司的Vitamin B12 ELISA检测试剂盒能用于维生素 B12的定量检测. 微孔内预包被有抗维生素 B12抗体.加样品或标准品和过氧化酶标记维生素 B12复合物. 游离维生素 B12和酶标物竞争与抗体结合位点结合.温室下孵育1小时后,用稀释洗涤液洗板去除未结合物质,加入底物液后孵育20分钟,溶液变成蓝色. 再加入终止液终止显色,溶液变为黄色. 最后在酶标仪处450 nm读取吸光度值. 维生素 B12的量与样品显色的强度成反比.
注意事项
遵守实验室操作规范(GLP)有利于获得可靠的实验结果.
1实验前,将所有试剂平衡至室温(20-25°C).
2使用前,将试剂倒置摇晃混匀. 避免产生气泡.
3实验一旦开始,所有步骤应在指定的时间内连续完成.
4试剂使用完后立即盖盖子.切勿互换瓶塞.
5使用一次性加样吸嘴加样,避免交叉污染.
6所有样品和标准品需一起检测,保证相同加样条件.
7切勿混用不同批号的试剂成分.
8切勿使用过期的产品
健康和安全说明
1禁止在实验室内吸烟,饮食或用嘴移液.
2 戴一次性手套处理患者样品
3避免底物液和终止液接触皮肤和黏膜.如不慎接触,用大量水冲洗.
4根据GLP规范使用和处理化学药品.
试剂盒成分
试剂盒足够96人份检测. 试剂盒存储于2-8°C.有效期见标签或外包装
1微孔反应板 ,可分拆,12条×8孔,预包被有抗维生素B12抗体
2维生素B12标准品(0; 0.4; 1; 4; 10; 40 ng/mL), 6瓶,每瓶0.5 mL,红色, 即用型.
3酶联复合物(过氧化酶标记维生素B12), 6 mL,红色,即用型.
4底物液(TMB) : 15 mL,即用型
5终止液(0.5 M H2SO4) : 15 mL,即用型
6样品稀释液(PBS) :2 x 60 mL,红色,即用型.
7洗涤液(PBS + 吐温 20): 30 mL,10倍浓缩. 蓝色. 1个单位的浓缩液+9个单位的蒸馏水稀释.
如冷冻过程中有结晶沉淀,将浓缩液在37°C 放15分钟.
8塑料胶膜,用于孵育过程盖板.
9塑料袋, 未使用的微孔板置其内保存.
10使用说明书
第3年
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