（德国DRG：EIA1560）
【产品名称】
通用名称：胰岛素原ELISA试剂盒
英文名称：Proinsulin ELISA
【产品规格】
96T
【预期用途】
该试剂盒可用于人血清、血浆中胰岛素原的定量检测
【前言简介】
血清胰岛素原的检测可为胰岛瘤的诊断提供有用的信息。在非胰岛素依赖性糖尿病（NIDDM）、新近诊断的胰岛素依赖性糖尿病（IDDM）和其它临床疾病患者的血清中，胰岛素原的水平也会提高。
胰岛素原是一由86个氨基酸分子组成的9390MW多肽，它主要由胰岛β细胞合成，是胰岛素的一个前体分子。大多数胰岛素原都转化成胰岛素和C肽，并且以等量形式分泌到血液中。大约有15%的胰岛素原不被转换并直接以胰岛素原的形式分泌。胰岛素原的生物活性只有胰岛素的10%，但其半衰期却是胰岛素的3倍。血清胰岛素原的水平可以反映出胰岛β细胞的生理状态。IDDM和NIDDM疾病患者的胰岛β细胞都表现为功能不正常。从IDDM发病一开始，病人血清胰岛素原的水平就会提高，而且IDDM病人的健康同胞兄妹的血清胰岛素原水平也会提高。NIDDM确诊病例的血清胰岛素原水平也会提高。以下患者的循环胰岛素原水平也会提高：年长的病人，孕妇或肥胖性糖尿病患者，胰岛瘤患者，功能性低血糖患者和高胰岛素血症患者，以及一些稀有的综合征患者。因为胰岛素原的结构与胰岛素的结构相似，因此在胰岛素检测中胰岛素原可作为免疫反应性胰岛素进行检测。免疫反应性胰岛素一般用传统的RIA方法进行检测，但RIA方法会过高估计胰岛素的水平，因为这种检测方法所使用的抗体会与胰岛素原发生交叉反应。通过计算胰岛素原和真正胰岛素的分子量比率，我们可以更好的评价β细胞的功能。
【检测原理】
DRG公司的胰岛素原酶免实验是一种基于夹心法原理的固相酶联免吸附实验（ELISA）。反应板上的微检测孔包被有能结合前胰岛素分子上独特抗原位点的单克隆抗体。一份含有内源性胰岛素原的病人样本在包被孔中与酶联物进行孵育，该酶联物是一种联结有辣根过氧化物酶的抗胰岛素原抗血清。孵育后，用洗涤液洗去未结合的酶联物。结合上的辣根过氧化物酶的总量与样本中前胰岛素的浓度成正相关。加入底物溶液后，显出的颜色强度与病人样品中胰岛素原的浓度成正比。
【试剂盒成分】
1) 微量反应板，1块 ( 96孔) ，微孔中包被了抗胰岛素原抗体。
2) 酶联物，1支，1.2ml，11×浓缩，内含辣根过氧酶标记的抗胰岛素原抗体。
3) 底物液，14ml (TMB)
4) 标准系列，1m/支l，6支（冻干粉），即：0；2.6；6.6；16.5；33；66pmol/l
转换系数：106pmol/l=1ng/ml，IRR 84/611。
5) 样品稀释液：2ml
6) 质控品（高/低） 2瓶 冻干 2ml 具体浓度见瓶身
7) 终止液: 0.5M的H2SO4,，14ml
8) 洗涤掖：30ml，40×浓缩
9) 酶联物稀释液：12ml
10) 检测缓冲液：12ml
实验需要器材（但试剂盒不提供）
1) 酶标仪(450±10nm)。
2) 移液器（50μl，100μl）
3) 吸水纸
4) 标准水箱
5) 去离子水
6) 酶联物稀释用的10ml塑料试管
【贮存及稳定】
未开启的试剂在2—8℃下贮存，在有效期内可以保持活性。不要使用过期试剂，酶联物、底物溶液、标准品和零标准品必须在2—8℃下贮存。
微孔反应板必须在2—8℃下贮存。一旦包装袋被打开，必须将它小心地严封起来。如果包被板的包装被打开，其免疫活性在6周内稳定，但前提是必须将它密封在装有干燥剂的袋子里。
【样品的采集及处理】
此检测试剂盒要使用血清或血浆，静脉穿刺采集全血时注意常规注意事项。不需要对样品进行任何特殊的预处理。
在实验开始之前，样品可在２-８℃下可贮存24小时，如将样品冻存于-20℃的环境下，则样品可存放更长时间。
解冻的样本在检测之前必须上下倒置几次。不能使用明显溶血﹑黄疸和明显脂血的样品。样品中前胰岛素浓度高于标准曲线上限值的必须用样品稀释液进行进一步稀释。
第3年
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