乙脑病毒IgM酶联诊断试剂盒

产品资料

通用名称：乙脑病毒IgM检测试剂盒（捕获法）

英文名称：JE Detect™IgM Antibody Capture ELISA (MAC-ELISA)

产品规格：96T

产品用途

乙脑病毒IgM酶联诊断试剂盒可用于人血清中抗重组抗原（来源于JEV）的IgM抗体的检测。此试剂盒并不用于血液或血液成分的筛查，且该试剂盒尚未针对疫苗诱导的血清转化研究进行优化，仅供专业人士和体外检测使用。

【前言简介】

感染日本脑炎病毒会引起包括脑炎等一系列症状。本试剂盒使用了一种称为JERA的重组抗原，它可以作为日本脑炎病毒感染的血清学敏感标记物。JERA蛋白是由日本脑炎病毒抗原的不同部分的肽链构成的重组抗原。

测定原理

乙脑病毒IgM酶联诊断试剂盒由一种酶促扩增的“两步”夹心式免疫测定法组成。在测试中，JE阴性质控，阳性质控和使用样本稀释液稀释的未知样本首先加入到包被有抗人IgM抗体的微孔板上进行孵育，洗板之后分别与JEV衍生的重组抗原（JERA）和正常细胞抗原（NCA）一起温育。再次洗板后加入HRP标记的抗乙脑抗体。洗板，加入TMB作为显色剂，一段时间后加入终止液以终止底物反应。所形成的颜色强度与样本中的特异性抗体成正比。当吸光度高于一定值时，JERA和质控品的吸光率可准确地测定JEV抗体是否存在。

检测流程

1）确定所需微孔板数量并做好标记（JERA和NCA部分质控品都应做双孔，样本可做单孔或双孔）

2）用样本稀释缓冲液1:100稀释血清样本和质控品（至少使用4µL进行稀释，例如，4µL血清+396µL样本稀释缓冲液）

3）将50µL稀释后的质控品和样本加入相应的孔中

4）封板，在37℃培养箱中孵育1小时

5）在洗板机上每孔每次用300µL洗涤缓冲液洗涤6次

6）将50µL JERA加入A-D行中，将50µL NCA加入E-H行中

7）封板，在37℃培养箱中孵育1小时

8）重复洗涤步骤

9）将50µL酶联物加入每个孔中

10）封板，在37℃培养箱中孵育1小时

11）重复洗涤步骤

12）将150µL EnWash加入所有孔中

13）封板，在室温下孵育5分钟

14）重复洗涤步骤

15）将75µL底物液加入所有孔中

16）在室温下黑暗中孵育10分钟（不封板）

17）将50µL终止液加入所有孔中

18）加入终止液后5分钟内，测量450nm处吸光度

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