联系我们

联系人：成辰

点击查看联系方式

资料下载

人抗促甲状腺素受体抗体（TRAb）说明书

详细内容下载：

文件大小：486kb

上传时间：2012/11/30 15:26:58

文件类型：pdf

上传者：博研生物科技有限公司上海分公司

查看次数：326次

下载次数：143次

人抗促甲状腺素受体抗体（TRAb）实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗促甲状腺素受体抗体（TRAb）水平。用纯
化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被单抗的微孔中依次加入抗促甲状腺素受体抗体
（TRAb），再与 HRP 标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后
加底物TMB显色。TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄
色。颜色的深浅和样品中的抗促甲状腺素受体抗体（TRAb）呈正相关。用酶标仪在 450nm
波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人抗促甲状腺素受体抗体（TRAb）
浓度

人抗促甲状腺素受体抗体（TRAb）操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
48 U/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
24 U/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
12 U/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
6 U/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
3 U/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，
然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30秒后弃去，如此
重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50 μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止
液后15分钟以内进行。