本标准规定了保健食品中免疫球蛋白 IgG的测定方法。 本标准适用于片剂、胶囊、粉剂类型保健食品中免疫球蛋白 IgG的测定。 本方法检出限：当取样量 0.1g，稀释至25mL，进样量20μL时，检出浓度为0.5mg/mL。 原理 根据高效亲和色谱的原理，在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白 IgG与配基连接，在pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。 试剂 流动相 A：pH6.5 0.05mol/L 磷酸盐
适用范围
本标准规定了保健食品中免疫球蛋白 IgG的测定方法。
本标准适用于片剂、胶囊、粉剂类型保健食品中免疫球蛋白 IgG的测定。
本方法检出限：当取样量 0.1g，稀释至25mL，进样量20μL时，检出浓度为0.5mg/mL。

原理
根据高效亲和色谱的原理，在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白 IgG与配基连接，在pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。

试剂
流动相 A：pH6.5 0.05mol/L 磷酸盐缓冲液
流动相 B：pH2.5 0.05mol/L 甘氨酸盐酸缓冲液
IgG标准贮备液：称取IgG标准品（Sigma化学公司）0.0100g,用流动相A（3.1）溶解并定容至10.0mL,摇匀，浓度为1.0mg/mL。
IgG标准系列溶液：取IgG标准贮备液，用用流动相A（3.1）稀释成含IgG 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0mg/mL的标准系列。临用时配制。

仪器和设备
高效液相色谱仪具紫外检测器和梯度洗脱装置。

分析步骤
试样处理：称取 0.1g（精确至0.001g）试样，用流动相A（3.1）稀释至25.0mL,摇匀，通过0.45μm微孔滤膜后进样。
5.2.1 先用5倍柱体积的重蒸水洗柱，再用10倍柱体积的流动相A（3.1）平衡柱，进样，按洗脱程序进行洗脱。
5.2.2 HPLC参考条件
色谱柱： Pharmacia HI-Trap Protein G柱，1mL。
波长： 280nm
进样量： 20μL
梯度洗脱表：
Time Flow mL/min A% B% Gradient
0 0.4 100 0 ※
4.5 0.4 100 0 6
5.5 0.4 0 100 6
15.0 0.4 0 100 6
15.5 0.4 100 0 6
22.0 0.4 100 0 6

蛋白质 G 柱	Pharmacia HI-Trap Protein G柱，1mL（5支/包）
蛋白质 G 柱	Pharmacia HI-Trap Protein G柱，1mL（2支/包）