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保存酶的过程中有四个要点需重点注意
点击次数: 721发布时间:2014/12/25 9:44:24
- 上 传 者: 上海恒远生物科技有限公司
- 上传时间: 2014/12/25 9:44:24
- 文件大小: 137KB
- 文件类型: doc
- 所属分类: 其它资料
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- 查看次数: 721
资料简介: 酶的保存条件的选择必须有利于维护酶天然结构的稳定性,而保存酶的过程中有四个要点需重点注意:
1. 温度
酶的保存温度一般在0℃-4℃,但有些酶在低温下反而容易失活,因为在低温下亚基间的疏水作用减弱会引起酶的解离。此外,零度以下溶质的冰晶化还可引起盐分浓缩,导致溶液的PH值发生改变,从而可能引起酶巯基间连接成为二巯键,损坏酶的活性中心,并使酶变性。
2. 缓冲液
大多数酶在特定的PH值范围内稳定,偏离了这个范围便会失活,这个范围因酶而异,如溶菌酶在酸性条件下稳定,而固氮酶则在中性偏碱性条件下稳定。
3. 氧防护
由于巯基等酶分子基团或Fe-S中心等容易为分子氧所氧化,故这类酶应加巯基保护剂或在氩气或氮气中保存。
4. 蛋白质的浓度及纯度
一般来说,酶的浓度越高,酶越稳定,制备成晶体或干粉更有利于保存。此外,还可通过加入酶的各种稳定剂如底物、辅酶、无机离子等加强酶稳定性,延长酶的保存时间。
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