犬白细胞介素 6 (IL-6)试剂盒说明书下载_资料下载

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资料下载

犬白细胞介素 6 (IL-6)试剂盒说明书下载

点击次数： 627发布时间：2013/1/16 11:41:19

上传者： shhybio
上传时间： 2013/1/16 11:41:19
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文件类型： jpg
所属分类：其它资料
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资料简介：

犬白细胞介素 6 （IL-6）试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围： 96T

20pg/ml-480pg/ml

使用目的：

本试剂盒用于测定犬血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素 6 （IL-6）量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬白细胞介素 6 （IL-6）平。用纯化的犬白细胞介素 6 （IL-6抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素 6 （IL-6）再与HRP标记的白细胞介素 6 （IL-6）体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素 6 （IL-6）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中犬细胞介素 6 （IL-6））浓度。

犬白细胞介素 6 （IL-6）试剂盒组成

1	30倍浓缩洗涤液	20ml×1瓶	7	终止液	6ml×1瓶
2	酶标试剂	6ml×1瓶	8	标准品（960pg/ml）	0.5ml×1瓶
3	酶标包被板	12孔×8条	9	标准品稀释液	1.5ml×1瓶
4	样品稀释液	6ml×1瓶	10	说明书	1份
5	显色剂A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2张
6	显色剂B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

犬白细胞介素 6 （IL-6）试剂盒操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

480pg/ml	5号标准品	150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
240pg/ml	4号标准品	150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
120pg/ml	3号标准品	150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
60pg/ml	2号标准品	150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
30pg/ml	1号标准品	150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃

避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

犬白细胞介素 6 （IL-6）试剂盒注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月

上海恒远生物科技有限公司是中国大陆第一家专业经营ELISA试剂盒，人ELISA试剂盒，大鼠ELISA试剂盒，小鼠ELISA试剂盒，裸鼠ELISA试剂盒，仓鼠ELISA试剂盒专卖的公司。我司先后与河南中医学院、复旦大学、同济大学、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、仁济医院、曙光医院、华山医院、瑞金医院等多家单位建立了良好的合作关系。公司致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学、细胞生物学、免疫学等生物科技实验需求。

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