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固相萃取法提取血浆中的亚甲蓝
点击次数： 3784发布时间：2013/6/30 10:17:49
- 上 传 者： sh101733
- 上传时间： 2013/6/30 10:17:49
- 文件大小： 111KB
- 文件类型： pdf
- 所属分类： 应用方法
- 下载次数： 479次
- 查看次数： 3784
资料简介： 使用固相萃取仪及相应的萃取小柱对血浆中亚甲蓝萃取分离，再使用分光光度法进行测定，可以准确检测出血液中亚甲蓝的含量。对血液及其成份中的病毒进行灭活是保证输血安全的措施之一，亚甲蓝光化学法（MB-P法）是临床应用的常用方法。研究表明病毒滴度降低程度与所用的可见光强度和亚甲蓝浓度有直接关系，亚甲蓝存在突变的可能，若残留量过多，血浆的外观和色泽将明显改变，因此必须要控制血浆中的亚甲蓝浓度。 实验中所需样品及仪器： 1. 样品：血浆200ml，用MB-P法制备的病毒灭活血浆过滤前后的样品各一份。 2. 仪器及试剂：固相萃取仪，无油隔膜真空泵，可见-紫外分光光度计，固相萃取柱，甲醇，冰醋酸，漩涡混合器 实验方法： 1. 配置亚甲蓝标准溶液：精密称取亚甲蓝0.0374g（100umol）至于容量瓶中，配置成100umol/L的储备液，避光密封保 2. 萃取小柱预处理：用3ml甲醇对萃取小柱进行活化，甲醇完全吸入后，用3ml蒸馏水冲洗甲醇。 3. 上样：将固相萃取小柱安装在固相萃取仪的阀门上方，然后将含有亚甲蓝的血浆样品加入到小柱中，启动无油隔膜真空 4. 淋洗：待样品完全吸入小柱后，使用清洗剂淋洗，洗掉杂质。 5. 洗脱：在固相萃取仪中放入干净试管，使用洗脱剂洗脱萃取小柱中的亚甲蓝，然后使用漩涡混合器将试管中的洗脱液混匀。 6. 使用分光光度法测定亚甲蓝的含量。 我公司用于此类分析的产品： 一.USE-12S/C固相萃取装置 技术参数 1. 向该装置提供的真空压力不应大于0.1Mpa。 2. 固相萃取柱与接头应安装配合好,当发现系统总是达不到设定压力时，请检查各接头是否拧紧,气压盖密封垫是否平整。 3. 玻璃器件在操作过程中请一定放置平稳。 4. 系统配有12支流量调节阀，当某一路不使用时，可将其关闭，以保证系统保持一定压力。 5. 系统的负压力一般不应超过-0.085Mpa。 主要特点 1. 高回收率和高富集倍数 2. 操作简单、快速、易于实现自动化 3. 防交叉污染、防雾化真空槽设计 4. 密封性好、一致性高 5. 无相分离操作，易于收集分析物组合，能处理小体积试样 6. 可配大容量采样器、快速浓缩干燥装置、可批处理样品 二.UVS系列漩涡混合器 主要特点 1. 调速范围广，无级调速，液晶显示
存。分别取储备液0.1ml，0.25ml，0.5ml，1ml，2ml，用血浆稀释，配置血浆标准溶液。
泵抽负压，打开固相萃取仪的阀门，分析物吸附在萃取小柱上。
2. 工作方式：连续/点动/脉冲模式，具有定时功能
三.固相萃取柱
关键词：固相萃取仪 漩涡混合器 固相萃取柱
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