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公司新闻
Elisa实验操作全流程
点击次数：127发布时间：2026/9/2 9:03:53
Elisa实验操作全流程
ELISA 全称酶联免疫吸附试验，是基于抗原 - 抗体特异性结合的定量检测技术，核心用于测定血清、血浆、细胞上清、组织裂解液、体液等生物样本中目标蛋白（如 TNF-α、细胞因子）浓度。 操作方法（可参考，具体见说明书）
1、样本 / 标准品孵育 每孔加 100μL 标准品工作液或待测样本，37℃恒温孵育 60min，捕获抗体结合样本内目标抗原。 生物素化检测抗体孵育 弃去孔内液体，无需洗板，立即加入 100μL
2、生物素标记抗体工作液，37℃孵育 60min，形成夹心免疫复合物。
3、洗板去除未结合杂质 每孔加 300μL 1× 洗涤液，静置 1min 后拍干，重复洗涤 3 次，清除游离抗原、杂蛋白、未结合抗体，降低背景干扰。
4、HRP 链霉亲和素结合 每孔加入 100μL HRP 酶结合物，37℃孵育 30min；孵育结束后洗板 5 次，去除游离 HRP 复合物。
5、TMB 底物避光显色 每孔加 90μL TMB 显色液，封板膜密封，37℃避光孵育 15min，底物发生酶促反应呈现蓝色。
6、终止反应 每孔加入 50μL 终止液，体系由蓝色转为黄色，终止酶促反应。
7、酶标仪读数 加终止液后立刻在 450nm 波长检测各孔 OD 吸光度值，避免长时间放置数值漂移。
8、数据拟合计算 将标准品浓度与对应 OD 值导入软件，拟合标准曲线，代入样本 OD 换算对应蛋白浓度。
① 抗体/蛋白氨基酸全测序服务
② N/C 端测序、二硫键分析、肽图序列覆盖度、分子量测定、N糖基化位点、翻译后修饰（甲硫氨酸，色氨酸氧化，NQ脱酰胺等）、序列变异分析、N-/O-糖肽分析、ciEF、HCP宿主残留蛋白、SDS-CE、SEC-HPLC分析、DLS、DSC。
【仪器分析服务】
① 电镜测试（SEM、TEM、AFM、透射、CT 等）
② 热分析测试（TG、TG-DSC等）
③ 吸附测试（BET、动态水吸附仪（DVS）等）
④ 能谱测试（XPS、XRD等）
⑤ 光谱测试（FTIR、Raman、XRF、等）
⑥ 元素测试（ICP-OES/MS、EA、碳硫分析仪、ASS 等）
⑦ 波谱测试（液体 NMR、穆斯堡尔谱仪等）
⑧ 色谱质谱测试（GPC、HRMS、IC、HPLC、GC、LCMS 等）
⑨ 物理性能测试（纳米粒度及 Zeta 电位分析仪等）
⑩ 结构解析（小分子有机物、未知物结构、药物杂质等）
