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公司新闻
娜连生物如何使细胞快速适应无血清培养基?有这2种方法!
点击次数:244发布时间:2025/9/30 9:48:06
许多细胞系容易适应无血清培养基和无蛋白培养基,而对环境要求过高的其它细胞却难以适应变化,这就需要更为专业的方法来适应变化。而根据细胞系的特性,有两种方法可使细胞快速适应无血清培养基:种方法是连续适应/循序隔绝法;另一种方法是直接适应。
一、连续适应/循序隔绝法
先来介绍种方法:连续适应/循序隔绝法。通过一系列的血清还原步骤,使细胞适应无血清培养基。这是优先选用的方法,且不对细胞培养环境形成太过恶劣的影响。以下是这种方法的两种操作步骤:
种操作步骤:
使原培养基内的细胞连续地经过以下几个阶段:
阶段1:75%补加血清的培养基或25%无血清培养基
阶段2:50%补加血清的培养基或50%无血清培养基
阶段3:25%补加血清的培养基或75%无血清培养基
阶段4:100%无血清培养基
第二种操作步骤:
1、以原培养基中的相同浓度,将血清加入无血清培养基内。将细胞从含血清的原培养基转移到加了血清的无血清培养基,此时应注意要提高新培养系统中的细胞密度。让细胞有一个适应过渡期。
2、按照种操作步骤流程,缓慢地降低血清浓度,使细胞在每个阶段有适应的时间。
3、一旦血清补加量降为0,在用于进行分析或其他操作前,让细胞培养物具有数个适应过渡期。
二、直接适应法
现在来介绍第二种方法:直接适应。以下是操作步骤:
细胞直接从含血清培养基转移到无血清培养基内。将大量细胞直接转移到无血清或无蛋白的新培养基内。细胞必须处于指数生长期中期,且存活率>90%。
每3-4天更换约50%的培养基,以防止培养基变成酸性。维持高于正常值的细胞培养密度,直至培养的细胞需要每日更换培养基。这时,将细胞扩增到多个培养瓶内。







