HB101 感受态

产品简介 HB101 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的杂合产物（同时也是 Stbl3 的原始菌株）。该菌株 携带 recA13 突变，可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率；但由于其不含核 酸酶 endA1 突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液以去除 核酸酶。hsdS20 背景使 HB101 缺失内切酶系统，增强了外源 DNA 的稳定性和提取质量；此菌株具 有链霉素抗性；不存在 lacIqZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。经 pUC18 质粒转化检测，HB101 感 受态细胞的转化效率可达 107 cfu/µg DNA。HB101 感受态

产品组成 组分 HB101 化学感受态细胞 10 × 100 µL 100 × 100 µL 定制 基因型：F- mcrB mrr hsdS20 (rB- mB- ) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (StrR) glnV44 λ- 存储条件 -80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 无外源质粒 DNA 残留； 化学法转化效率≥107 cfu/µg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化； 2. 将待转化 DNA 加入到 100 µL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min； 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min； 4. 向离心管中加入 900 µL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min； 5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用； 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10； 3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可； 4. 为确保*高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。