ArcticExpress(DE3)感受态

产品简介 ArcticExpress (DE3)来源于 E. coli B 菌株，为 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型菌株，可促进表达蛋白的 稳定。ArcticExpress (DE3)菌株染色体 DNA 中整合了λ噬菌体 DE3 区，使得 ArcticExpress (DE3)菌 株可同时表达 T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶，广泛用于 pET 系列，pGEX，pMAL 等质粒 的蛋白表达。ArcticExpress (DE3)菌株具有四环素，庆大霉素抗性，endA1 突变有利于质粒 DNA 的 稳定。[cpn10cpn60 GentR]的存在使 ArcticExpress (DE3)可以表达适应低温的伴侣蛋白 Cpn10 和 Cpn60（来自嗜冷菌—Oleispira antarctica）。Cpn10 和 Cpn60 伴侣蛋白在 4 - 12 ℃表现出较高活性， 在 ArcticExpress (DE3)细胞中表达时，可降低重组蛋白包涵体的形成，增加可溶重组蛋白的表达量 及生物活性，比传统的原核表达伴侣蛋白 GroEL、GroES 等具有更加的促融性能。吐露港生产 的 ArcticExpress (DE3)感受态细胞经特殊工艺制作，pUC18 质粒检测转化效率达 108 cfu/µg DNA。ArcticExpress(DE3)感受态

产品组成 组分 ArcticExpress(DE3) 感受态细胞 10 × 100 µL 100 × 100 µL 定制 基因型：E. coli B F– ompT hsdS (rB– mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR] 存储条件 -80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 无外源质粒 DNA 残留； 化学法转化效率≥108 cfu/µg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化； 2. 将待转化 DNA 加入到 100 µL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min； 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min； 4. 向离心管中加入 900µL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min； 5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用； 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10； 3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可； 4. 为确保*高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。