Stbl4感受态

产品简介 Stbl4 电转化大肠杆菌细胞是 Stbl2 细胞的衍生物，非常适合克隆不稳定插入物，如逆转录病毒序列、 直接重复序列和串联阵列基因。此外， Stbl4 细胞可用于使用质粒衍生载体产生 cDNA 文库，并能 够吸收和维持大质粒(例如 50kb 粘粒和 100 - 200 kb P1 克隆)。Stbl4 细胞还含有一个 F’附加体，允 许它们作为单链 DNA 的宿主，如 M13mp 克隆载体。由于携带 lacZΔM15 突变，因此该菌可用于含 Xgal 和 IPTG 的琼脂平板上菌落的蓝/白斑筛选。mcrA 突变和 mcrBC - hsdRMS - mrr 缺失允许克隆甲 基化的基因组序列。*后，endA1 突变大大提高了质粒产量和质量。经 pUC18 转化检测，Stbl4 感 受态细胞的效率可达 108 cfu/µg DNA。 产品组成 组分 Stbl4 感受态细胞 10 × 100 µL 100 × 100 µL 定制 基因型：mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) recA1 endA1 gyrA96 galthi-1 supE44 λ- relA1 Δ(lac-proAB)/F' proAB+lacIqZΔM15 Tn10 (TetR) 存储条件 -80 ℃保存，请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 无外源质粒 DNA 残留； 化学法转化效率≥108 cfu/µg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化； 2. 将待转化 DNA 加入到 100 µL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min； 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min； 4. 向离心管中加入900 µL LB或SOC培养基（室温或37 ℃预热），然后置于37 ℃摇床复壮45 min； 5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用； 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10； 3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可； 4. 为确保*高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。