TOP10/P3感受态

产品简介 TOP10/P3 大肠杆菌菌株含有 60-kb 低拷贝数的 P3 质粒，该质粒携带卡那霉素、四环素和氨苄抗性 基因。四环素和氨苄抗性基因携带琥珀突变，这使得这些基因在细菌的正常生长和复制过程中不 活动。在转化携带抑制因子基因(例如 pcDNA1.1 或 pCDM8)的质粒后，四环素和氨苄抗性基因中的 琥珀突变被抑制，从而使宿主大肠杆菌对这些抗生素具有抗性。经 pUC18 质粒转化检测， TOP10/P3 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/µg DNA 以上。TOP10/P3感受态

组成 组分 TOP10/P3 化学感受态细胞 10 × 100 µL 100 × 100 µL 定制 基因型：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araD139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG 存储条件 -80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 无外源质粒 DNA 残留； 化学法转化效率≥108 cfu/µg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化； 2. 将待转化 DNA 加入到 100 µL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min； 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min； 4. 向离心管中加入 900 µL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min； 5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用； 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10； 3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可； 4. 为确保*高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。