NovaBlue (DE3)感受态

产品简介 NovaBlue(DE3)来源于 K12 菌株，具有极高的转化效率，是转化效率*高的原核表达菌株，可同时 用于普通质粒的构建和蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株染色体 DNA 中整合了噬菌体 λDE3 序 列，使得 NovaBlue(DE3)菌株可用于 pET 系列、pGEX、pMAL 等质粒的蛋白表达。NovaBlue(DE3) 菌株具有四环素抗性，endA1 和 recA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取； lacZΔM15 突变使得 NovaBlue(DE3)可用于蓝、白斑实验筛选。经 pUC18 质粒转化检测，NovaBlue (DE3)感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/µg DNA 以上。NovaBlue (DE3)感受态

产品组成 组分 NovaBlue(DE3) 感受态细胞 10 × 100 µL 100 × 100 µL 定制 基因型：F- [proA+B+ lacI q ZΔM15::Tn10 (TetR)] endA1 hsdR17(rk12- mk12+) supE44 thi -1 recA1 gyrA96 relA1 lac (DE3) 存储条件 -80 ℃保存，请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。 质量控制 无外源质粒 DNA 残留； 化学法转化效率≥108 cfu/µg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化； 2. 将待转化 DNA 加入到 100 µL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min； 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min； 4. 向离心管中加入 900 µL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min； 5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用； 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10； 3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可； 4. 为确保*高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。