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更新时间:2026/9/7 20:58:56关注度:12
关键词标签:感受态,Origami,2,(DE3)感受态
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Origami 2 (DE3)感受态
产品简介 Origami 2 系列感受态细胞是 K-12 细胞的衍生而来,在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助 于表达含二硫键蛋白的活性蛋白。Origami 2 (DE3) 菌株染色体整合了 λ 噬菌体 DE3 区 (DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶)适合 T7 启动子诱导的蛋白表达。Rosetta-gami 2(DE3)菌株具有氯霉素,链 霉素,四环素抗性,经 pUC18 质粒转化检测,Origami 2 (DE3)感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/µg DNA。Origami 2 (DE3)感受态
产品组成 组分 Origami 2 (DE3) 化学感受态细胞 10 × 100 µL 100 × 100 µL 定制 基因型:Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F′[lac+ lacIq pro] (DE3) gor522 ::Tn10 trxB (StrR, TetR) 存储条件 -80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/µg pUC18 DNA 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化; 2. 将待转化 DNA 加入到 100 µL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min; 4. 向离心管中加入 900 µL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用; 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 4. 为确保*高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
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