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更新时间:2026/9/7 20:58:56关注度:24
关键词标签:感受态,Rosetta,Blue感受态
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Rosetta Blue感受态
产品简介 该菌株属于 Novablue 衍生菌株,具有很高的质粒转化效率,也可同时表达多种稀有密码子 tRNA, 可用于真核蛋白的表达。该菌株没有整合 λ 噬菌体的 DE3 区,因此该菌株自身不能表达 T7 RNA 聚 合酶,也不能用于 T7 启动子驱动的蛋白诱导表达。Rosetta Blue 感受态细胞经特殊工艺制作, pUC18 质粒检测转化效率>108 cfu/µg DNA。 产品组成 组分 Rosetta Blue 感受态细胞 10 × 100 µL 100 × 100 µL 定制 基因型:endA1 hsdR17 (rK– mK+) supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac F' [proA+B+ lacIqZ∆M15::Tn10] pRARE2 (CamR , TetR) 存储条件 -80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 除 pRARE2 外,无外源质粒 DNA 残留; 化学法转化效率≥108 cfu/µg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化; 2. 将待转化 DNA 加入到 100 µL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min; 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90s 后,立刻置于冰水浴中静置 2-3 min; 4. 向离心管中加入 900µL LB 或 SOC 培养基(室温或 37 ℃预热),然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min; 5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用; 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10; 3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可; 4. 为确保*高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
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