T7 Express 感受态

产品简介 T7 Express 菌株为大肠杆菌 BL21 增强型菌株，为 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型，主要适用于含有 T7 启动子的原核表达载体(如 pET 等)的蛋白表达，同样适用于需要利用大肠杆菌自身 RNA 聚合酶来 转录 RNA 的非 T7 启动子的表达载体（如 pGEX 等）。该菌株区别于 BL21(DE3)菌株的优势在于 T7 RNA 聚合酶基因整合在细菌染色体上的 lac操纵子区域，基因组中无 λ前噬菌体序列，并具有抗 T1 噬菌体感染等特点。T7 Express 表达感受态细胞经特殊工艺制作，pUC18质粒检测转化效率大于 108 cfu/µg DNA。 产品组成 组分 T7 Express 感受态细胞 10 × 100 µL 100 × 100 µL 定制 基因型：fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr⁻⁷3::miniTn10--TetS )2 [dcm] R(zgb-210::Tn10-- TetS) endA1 (mcrC-mrr)114::IS10 存储条件 -80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 无外源质粒 DNA 残留； 化学法转化效率≥108 cfu/µg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化； 2. 将待转化 DNA 加入到 100 µL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min； 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min； 4. 向离心管中加入 900µL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min； 5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用； 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10； 3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可； 4. 为确保*高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。