Tuner（DE3）感受态

产品简介 Tuner(DE3)菌株是 BL21 菌株的 lacZY 基因 (半乳糖苷透性酶基因)突变株，此突变导致 IPTG 以均一 速度进入体系中大肠杆菌的每个细胞，产生更加严格、均一的浓度依赖。此菌株用于高效表达克 隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体 (如 pET 系列)的基因。λ 噬菌体 DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶，该区整合于 Tuner 的染色体上，所以称为 Tuner(DE3)，可同时表达 T7 RNA 聚合酶和大肠 杆菌 RNA 聚合酶，可用于 pET 系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。Tuner(DE3)感受态细胞由 特殊工艺制作，pUC18 质粒检测转化效率达 107 cfu/µg DNA。 产品组成 组分 Tuner(DE3)感受态细胞 10 × 100 µL 100 × 100 µL 定制 基因型：F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm lacY1 λ(DE3) 存储条件 -80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 质量控制 无外源质粒 DNA 残留； 化学法转化效率≥107 cfu/µg pUC18 DNA。 使用方法 1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化； 2. 将待转化 DNA 加入到 100 µL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min； 3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min； 4. 向离心管中加入 900µL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min； 5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。 注意事项 1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用； 2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10； 3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可； 4. 为确保*高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔