Rosetta-gami B 菌株

产品简介 Rosetta-gami B 系列菌株来源于 Origami B 系列菌株，是集合了 BL21 系列，Rosetta 系列菌株和 Origami 系列菌株的优点，极大的增强了细胞内二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密码子的 真核细 胞蛋白的表达能力。Rosetta-gami B 系列菌株是来源于 Origami B 系列菌株，携带有 TrxB 和 Gor 基因 突变，提高含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达。本菌株含有 pRARE 质粒，能够提 供原 Rosetta(DE3)宿 主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六个稀有密码子的 tRNA 外，增加了真核细胞的在大肠 杆菌中的蛋白表达水平。在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase (gor)基因上同时含有突 变，这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成 二硫键，有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。TrxB 和 Gor 基因突变使得质粒能够分别具有卡 那和四环素抗性，所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质 粒的蛋白表达。Rosetta-gami B 感受 态细胞来源于含有 BL21 系列菌株中的 lacZY 基因突变，能够通过 IPTG 高效控制目的基因的表 达。Rosetta-gami B 感受态细胞能够用于氨苄抗性和壮观霉素抗性质粒的原核表达。 产品组成 组分 96146 Rosetta-gami B 大肠杆菌表达菌株 0.3mL 甘油菌 基因型：F - ompT hsdSB (rB -mB - ) gal dcm lacY1 ahpC gor522::Tn10 trxB pRARE (CamR , KanR , TetR ) 基本信息： 抗 性 : 氯霉素抗性（Chl）、卡那霉素抗性（Kan）、四环素抗 性（Tet） 培 养 基 : LB 菌 株 类 别 : 大肠杆菌表达菌株 培 养 条 件 : 37℃，有氧 质 粒 转 化 : 42℃热激 保 存 方 式 : 20%甘油，-80℃ 基 本 应 用 : 蛋白表达 保藏条件： -20℃保存（复溶液于 2-8℃保存）； 操作说明： 1.本品包含一份甘油菌，使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液 体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。 2.为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆菌落进行后续操作。 冷冻管开封：用浸过 75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。 菌株复溶：无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取 1ml 左右复溶液，加入到冷冻管中。轻轻 振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。 菌株复壮：用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。做好标识，在适宜温度下培养。细菌 在 30-35℃培养箱中培养 24-48h，真菌在 23-28℃培养箱中培养 24⁻⁷2h（必要时，可适当延长培养 时间）。