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麻痹性贝类毒素快速检测试剂盒OunuoAT91004
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详细内容
麻痹性贝类毒素快速检测试剂盒
使用说明书
(货号:OunuoAT91004)
麻痹性贝类毒素快速检测试剂盒,本品采用竞争性酶联免疫检测技术,用于样本中PSP毒素的定量分析,可满足96次测试,在做复孔的情况下,一次最多可检测43个样本。
1.概述
本检测采用酶联免疫法定量检测麻痹性贝类毒素的存在。神经性贝毒是一种毒素,石房蛤毒素是麻痹性贝类毒素的一种。本检测可用于水产样本对贝类毒素的定性和定量检测,例如甲壳类动物的样本。对于甲壳类动物的需要提前制备样本。如果条件允许,阳性样本可以做HPLC,GC/MS或其他方法确认。
2.安全性说明
标准品溶液含有少量的石房蛤毒素。底物溶液含有四甲基联苯胺,终止液还有稀硫酸。避免皮肤与粘膜与终止液接触。若终止液与皮肤接触,可用水洗去。
3.贮藏与稳定性
试剂盒贮存在4-8°C。使用前试剂盒中溶液要恢复到室温(20—25度)。在保质期内试剂盒都可以正常使用。
4.检测原理
本实验采用直接竞争ELISA方法,用特异性抗体识别石房蛤毒素。样本中的石房蛤毒素可与石房蛤毒素-酶结合物竞争,同包被在微孔板上的兔抗-石房蛤毒素抗体结合。石房蛤毒素抗体与包被在微孔底部的二抗结合。洗板后加入底物溶液,显蓝色。蓝色的深度与石房蛤毒素在样本中的浓度成反比。颜色反应在规定时间内终止,颜色用酶标仪读值。每孔的样本浓度值可以通过标准曲线来读取。
5. 检测步骤
(1) 移取 50µL 标准品至相应微孔中;
(2) 移取 50µL 样本待测液至相应微孔中;
(3) 移取 50µL 酶结合物至所有微孔中;
(4) 加入 50µL 抗体至每一所需微孔中,用手指肚轻轻敲击微孔板架两侧混匀 1min;
(5) 室温(20-25℃)孵育 30min;
(6) 甩干微孔板,加入 300µL 洗液(1×),浸泡 5s 后倒出洗液,再重复 4 次,甩干并于无尘布上 拍干;
(7) 加入 100µL 底物,室温(20-25℃)避光孵育 10-15min,注意观察以防吸光度值过高;
(8) 加入 100µL 终止液,于 450/630nm 下读数。
6.试剂盒局限性和可能的干扰
样本中经常存在的大量的无机物和有机物经检测,并未为发现影响试剂盒的检测结果。然而,由于样本中发现有易变质的混合物,由它们引起的基质反应不可避免地会影响检测结果。操作失误也可能造成实验错误。如:贮存的问题。加样次序错误,加入溶液的体积错误,孵育的时间过长或者过短,影响免疫反应或者底物反应,实验过程中温度过低或者过高(低于10℃,大于30℃)。本试剂盒提供筛查神经性贝毒的筛查结果。阳性样本可采取其他的分析方法(GC,HPLC,其他方法)证明。
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