产品简介
发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌，它能够
感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。K599 发根农杆菌（NCPPB2659）含
有 pRi2659 农杆碱型 Ri 质粒，具有广泛的宿主范围（葫芦科，豆科，茄科等），同时具有链霉素
抗性。本公司生产的 K599 化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，pCAMBIA2301
质粒（卡那霉素
抗性）检测，转化效率≥ 103 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
K599
化学感受态细胞
10 ×100 μL
100 ×100μL
定制
基因型：Agrobacterium rhizogenes (StrR ) pRi2659 (agropine type)
存储条件
-80 ℃保存; 请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除农杆碱型 Ri 质粒 pRi2659 外，无外源质粒 DNA 残留
化学法转化效率≥103 cfu/μg。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，在手心融化成冰水混合物，置于冰水浴中；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置 10 分钟、液氮 5 分
钟（或干冰乙醇浴和-80℃冰冻）、37 ℃水浴 5 分钟、冰浴 5 分钟；
3.加入 900 μl 无抗生素的 YEB 液体培养基，于 28℃振荡培养 2~3 小时；
4. 6000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 YEB 平板
上，倒置放于 28 ℃培养箱培养 2-3 天。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. K599 具有链霉素抗性，不可用于具有链霉素抗性质粒的转化。
