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上海初态生物科技有限公司 主营产品:人elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,牛elisa试剂盒,犬elisa试剂盒,鸡elisa试剂盒,鸭elisa试剂盒,山羊elisa试剂盒,豚鼠elisa试剂盒,仓鼠elisa试剂盒,马elisa试剂盒,猴elisa试剂盒,猪elisa试剂盒,兔elisa试剂盒,绵羊elisa试剂盒,农残elisa试剂盒

第5年

当前位置: 阿仪网 > 上海初态生物科技有限公司 > 产品展示 > 生化试剂盒 > 辅酶Ⅰ系列 > NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒2022生物已更新

NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒2022生物已更新

价格:¥ 1280

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/9 14:40:14

产品摘要:NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒。MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中 MDH 是 TCA循环的关键酶,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中 MDH 催化草酰乙酸形成苹果酸。

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详细内容

紫外分光光度法

正式测定务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中 MDH 是 TCA循环的关键酶,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中 MDH 催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH 在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH 分为 NAD-依赖的 MDH 和 NADP-依赖MDH, NADP-MDH 主要存在于真核细胞中。

测定原理:

NADP-MDH 催化 NADPH 还原草酰乙酸生成苹果酸,导致 340nm 处光吸收下降。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL 石英比色皿和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

试剂一、提取液 60 mL×1 瓶,在 4℃保存;

试剂二、液体 50 mL×1 瓶,在 4℃保存;

试剂三、粉剂×2 支,-20℃保存;临用加入 300μL 蒸馏水,现配现用;

试剂四、粉剂×2 支,-20℃保存;临用加入 300μL 蒸馏水,现配现用。

样本测定的准备:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,

加入 1mL 试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:

1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。

2、 将试剂二在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。

3、 操作表:

试剂名称(μL)

测定孔

样本

20

试剂二

760

试剂三

10

试剂四

10

将上述试剂按顺序加入1 mL石英比色皿中,混匀后立即在 340 nm 波长下记录初始吸光度A1 和反应 1min 后的吸光度 A2,计算 ΔA=A1-A2。

注意:若 A1-A2 大于 0.5,需将样本用提取液稀释,使 A1-A2 小于 0.5,可提高检测灵敏度。

计算公式中乘以相应稀释倍数。


热门标签:NADP-苹果酸脱氢酶测试盒,生化试剂盒试剂盒,紫外分光光度法

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