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第5年

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20min全能基因组DNA提取试剂盒

价格:¥ 电议

品牌名称:通蔚生物型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/16 18:08:36

产品摘要:20min全能基因组DNA提取试剂盒该试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从动物组织、细胞、细菌、病毒、全血、血清、血浆、体液、病毒液、棉拭孖等样品中纯化出高纯度的DNA。可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern杂交等多种分子生物学实验。

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详细内容

20min全能基因组DNA提取试剂盒
描述:
该试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从动物组织、细胞、细菌、病毒、全血、血清、血浆、体液、病毒液、棉拭孖等样品中纯化出高纯度的DNA。可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern杂交等多种分子生物学实验。
(一)RNA 含量较高的动物组织、细胞、细菌样本的提取方法
(1) 样品组织悬液的制备:
动物组织用研钵研磨:将动物组织研磨粉碎,并取40~60mg 加入到1.5ml EP 管中,加入280μl无菌水,漩涡震荡10s
混合均匀,打开管盖加入50μl的Buffer AP4 裂解液和 5μl的RnaseA,漩涡震荡10s混合均匀,室温消化5min,以去除RNA。
动物组织用钢珠研磨:取50~80mg组织加入到400μl无菌水,在研磨仪上研磨 1min。在1.5 ml EP管底部加入50μl的
Buffer AP4裂解液,并在管盖上加入5μl的 RnaseA,取280μl 研磨好的组织悬液到1.5 ml EP管中,漩涡10s混合均匀,
室温消化 5min,以去除 RNA。
悬浮的细胞(104~108个)或细菌(106~1011 个):在1.5 ml EP管底部加入 50μl的Buffer AP4裂解液,并在管盖上加入
5μl的Rnase A,直接吸取280μl样品到上述EP管中,漩涡震荡10s混合均匀,室温消化5min,以去除RNA。
细胞或细菌沉淀:可用280μl无菌水重悬细胞和细菌沉淀,并加入50μl的 Buffer AP4 裂解液和5μl的RnaseA,漩涡震荡10s混合均匀,室温消化5min,以去除RNA。
(2)RNA消化完毕后,向上述溶液中加入20μl的蛋白酶K,漩涡10s混合均匀,并置于56℃水浴锅(或室温条件下)中消化5min。
(3)消化完毕后,向上述溶液中加入500μl的Buffer LB5,漩涡混合15s后,13000rpm高转速离心2min。将上清液倒入到吸附柱中。
(4)13000rpm离心1min,弃过柱液。向吸附柱中加入500μl的Washing Buffer,13000rpm离心15s。弃过柱液,并重复此步骤一次。
(5)将吸附柱重新放回离心机,13000rpm 空离心 2min,将残留的乙醇彻底甩干。
(6)(6)将吸附柱芯放入到 1.5 ml 收集管中,向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer,室温放置 1min,13,000rpm离心2min,
洗脱液即为基因组DNA,冷冻保存。
(二)RNA含量较低的样本(全血、血清、血浆、体液、病毒液、棉拭孖浸泡液等)的提取方法
在1.5 ml EP 管底部预先加入50μlBuffer AP4 裂解液,在管盖上加入20μl的蛋白酶K,直接吸取280μl的液体样本到Buffer AP4裂解液中。
上下颠倒,并漩涡混合 10s,使得样品、Buffer AP4 裂解液、蛋白酶 K 混合均匀,并置于 56℃水浴锅中(或室温)消化 5min。
按照上述步骤(3)-(6)进行上柱、漂洗、洗脱操作。
20min全能基因组DNA提取试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于其他用途。

热门标签:20min全能基因组DNA提取试剂盒,DNA试剂盒

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