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沪鼎文献:白细胞介素8,IL-10,肿瘤坏死因子a在文献中的应用

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上传时间：2020/5/28 16:54:49

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香烟烟雾对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能及血清细胞因子水平影响
熊英＼张金娟＼李玲＼陈燕２,吴艳俊＼黄惠妍２
（贵州医科大学１.机能实验室（花溪区大学城），贵阳５５００２５；
２．附属医院内科，贵阳５５０００４）

［摘要］目的探讨被动吸烟联合气道内注入脂多糖（ＬＰＳ）法制备大鼠慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）模型过程中，大鼠肺功能及血清中细胞因子水平的变化。方法７２只雄性ＳＤ大鼠随机均分为４周、６周、８周模型组，自然愈合３周、６周组和对照组。采用气管内两次注入ＬＰＳ联合持续熏烟的方法建立Ｃ０ＰＤ大鼠模型，动态监测被动吸烟过程中及停止熏烟后，动物肺功能指标０．３ｓ用力呼气容积（ＦＥＶａ３）及其与用力肺活量（ＦＶＣ）比值（ＦＥＶ０．３／ＦＶＣ）的变化；同时用酶联免疫吸附方法检测血清中白细胞介素８（ＩＬ－８）、白细胞介素１０（ＩＬ－１０）、肿瘤坏死因子ａ（ＴＮＦ－ｏ〇含量，并进行相关分析。结果与对照组比较，各模型组ＦＥＶａ３、ＦＥＶｍ／ＦＶＣ、ＥＬ－１０水平降低，ＩＬ－８、ＴＯＦ－ａ水平升高（Ｐ均＜０．０５）；且随着熏烟时间延长细胞因子及肺功能指标变化更为显著。模型组ＩＬ－８、ＴＮＦ－ｏｔ水平与ＦＥＶ０．３／ＦＶＣ呈负相关（ｆｋＯ．ＯＯｌ，ｄ．５７９；尸＝０．０３４，ｒ＝－０．３５４）。与对照组比较，自然愈合６周组ＩＬ－８、ＴＮＦ－ａ７ｊｃ平下降（尸均＜０．０５），ＩＬ－１０升高（尸＜０．０５），各自然愈合组ＦＥＶａ３、ＦＥＶ〇．３／ＦＶＣ均低于对照组〇Ｐ均＜０．０５）。结论香烟烟雾刺激能显著影响ＣＯＰＤ大鼠体内细胞因子水平。
［关键词］慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）；细胞因子；动物模型；香烟烟雾随着人口老龄化和环境污染加重，世界卫生组织预计慢性阻塞性肺疾病（ｃｈｒｏｎｉｃｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅｐｕｌｍｏｎａｒｙｄｉｓｅａｓｅ，ＣＯＰＤ）导致的社会经济负担将进一步增加［１１。吸烟和反复感染是人类ＣＯＰＤ的重要发病因素１２１，被动吸烟复合气道内注入脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）法建立的ＣＯＰＤ大鼠模型具有发病机制与人类相似、造模方法容易掌握的优点，是目前国内研究者常用的动物模型。该模型具有造模时间短，４周即可建立ＣＯＰＤ大鼠模型％］的优点，但亦存在实验动物短时间内需经受多种刺激（烟熏、ＬＰＳ、麻醉、气管滴注机械损伤等），以及熏烟的剂量较大的缺点。香烟烟雾对动物气道的直接损害，以及机体对刺激的应激反应都会引起动物体内细胞因子水平的改变。本实验就香烟烟雾对ＣＯＰＤ模型大鼠体内细胞因子水平的影响进行了探讨，以进一步明确该动物模型体内细胞因子水平变化的意义。
１材料与方法
１．１实验物及饲养条件７２只清洁级雄性ＳＤ大鼠，体质量（２００ ± ２０）ｇ，第三军医大学大坪医院实验动物中心提供［ＳＣＸＫ（军）２０１２－００１１］。于贵州医科大学实验动物中心［ＳＹＸＫ（龄）２０１２－０００１］适应性饲养１周后用于实验，环境温度１８￣２５°
Ｃ，通风良好。
１．２主要仪器与试剂
ＨＸ２００插管式呼吸传感器、ＢＬ－４２０Ｓ生物机能实验系统，成都泰盟软件有限公司；酶标仪，美国ＢｉｏＴｅｋ公司；黄果树（１０ｍｇ）过滤嘴香烟，贵州中烟公司；脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）（Ｌ２８８０－１０ｍｇ），索莱宝生物技术有限公司；白细胞介素８（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－８，ＩＬ－８）、ＩＬ－１０、肿瘤坏死因子ａ（ｔｕｍｏｕｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－ａｌｐｈａ＾ＴＮＦ－ａ）试剂盒，上海沪鼎生物技术有限公司；有机玻璃熏烟箱（５０ｃｍＸ４０ｃｍＸ２０ｃｍ）自制。

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