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qPCR系列 miRNA荧光定量PCR试剂盒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/21 7:25:32
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详细内容
qPCR系列 miRNA荧光定量PCR试剂盒 HRbio™ miRNA qPCR Kit miRNA荧光定量PCR试剂盒
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
HRbio™ miRNA qPCR Kit miRNA荧光定量PCR试剂盒 | HRF0711 | 50T |
产品描述
HRbio™ miRNA qPCR Kit采用 SYBR Green I嵌合荧光法的原理进行miRNA的荧光定量检测。本产品包含miRNA qPCR所需要的所有试剂，组分分别是：2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer。其中2×miRNA qPCR Mix（含SYBR Green）是专门为miRNA荧光定量检测而特别研发的新一代预混液形式的qPCR试剂。其中DNA polymerase采用的是抗体修饰的热启动形式，配合特殊的buffer体系，使得反应特异性更好，灵敏度更高，并且在更广的范围内进行准确定量。
产品组分
编号 | 组分 | HRF0711（125次×20 µl） |
HRF071-A | 2×miRNA qPCR Mix(with SYBR Green I) | 1.25 mL |
HRF071-B | Reverse primer（10µM） | 55 µL |
运输与保存方法
1.-20°C 避光保存至少 12 个月，使用前充分融解混匀。
2.2 ×miRNA qPCR Mix(With Sybr Green)短期使用可放在 4°C，避免反复冻融。
3.Reverse primer(10µM )每次用完置-20°C 保存。
注意事项
1.miRNA 链cDNA 的加入量不要超过real time PCR 体积1/10。
2.对于特殊的检测体系中，高含量的cDNA 模板易导致非特异性扩增，根据所检测miRNA 的丰度适当的稀释cDNA（5-10倍或者100倍）。
3.本品中含有荧光染料Sybr Green I，保存本品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
4.2 x miRNA qPCR Mix不含参比染料ROX，客户并根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX参比染料，用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差
5.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
6.本产品仅作科研用途！
操作步骤
在室温融化2 ×miRNA qPCR Mix和Reverse primer（10µM）。
使用时请将2 ×miRNA qPCR Mix上下颠倒轻轻均匀混合，避免起泡，并经轻微离心后使用。如果试剂没有混匀，其反应性能会有所下降。注：请不要使用振荡器混匀。
按照下表组分冰上进行反应液的配制：
组分 | 体积（µL） | 体积（µL） | 终浓度 |
2×miRNA qPCR Mix | 25 | 10 | 1× |
Forward Primer (10 µM) | 1 | 0.4 | 0.2 µM |
Reverse Primer (10 µM) | 1 | 0.4 | 0.2 µM |
miRNA链cDNA模板 | X | X | - |
无菌超纯水 | To 50 | To 20 | - |
【注】： 使用前务必充分混匀， 避免剧烈震荡产生过多气泡。
a) 引物浓度：通常引物终浓度为0.2 µM，也可以根据情况在0.1- 1.0 µM之间进行调整。
b) 模板浓度：如模板类型为未稀释cDNA原液，使用体积不应超过qPCR反应总体积的1/10。
c) 模板稀释：cDNA原液建议5- 10倍稀释，最佳模板加入量以扩增得到的CT值在20-30个循环为好。
d) 反应体系：推荐使用20µL或50 µL ，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
e) 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
qPCR系列 miRNA荧光定量PCR试剂盒 PCR 循环（三步法）
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 2-3 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10-20sec | 35-45 |
退火 | 60°C | 10-20 sec | |
延伸 | 72℃ | 20 sec | |
熔解曲线阶段 | 仪器默认设置 1 | ||
PCR 循环（二步法）
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 2-3 min | 1 |
变性 | 94℃ | 10 sec | 35-45 |
退火/延伸 | 60℃ | 30-34sec | |
熔解曲线阶段 | 仪器默认设置 1 | ||
【注】高特异性可选择两步法，高效率扩增可选择三步法。
a) 预变性时间： 根据不同模板和引物的具体情况可适当缩短至 2 min。
b) 退火温度和时间：请根据引物和目的基因的长度进行调整。
c) 荧光信号采集（★）：请按照仪器使用说明书要求进行实验程序设置，几种常见仪器的时间设定如下：
30sec 以上： Applied Biosystems: StepOne, StepOne Plus, 7500 Fast；Roche Applied Science: LightCycler 480；Bio-Rad: CFX96
31sec 以上：Applied Biosystems: 7300
34sec 以上： Applied Biosystems: 7500
d) 熔解曲线： 通常情况下可以使用仪器默认程序。
| 货号 | 品名 | 规格 |
| HRF0011 | Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 | 1000U |
| HRF0012 | Taq DNA Polymerase DNA聚合酶 | 5×1000U |
| HRF0021 | 2×HRbio™ Taq PCR Master Mix (Red) | 1mL |
| HRF0022 | 2×HRbio™ Taq PCR Master Mix (Red) | 5×1mL |
| HRF0023 | 2×HRbio™ Taq PCR Master Mix (Red) | 50×1mL |
| HRF0024 | 2×HRbio™ Taq PCR Master Mix (Red) | 100×1mL |
| HRF0025 | 2×HRbio™ Taq PCR Master Mix for PAGE | 1mL |
| HRF0026 | 2×HRbio™ Taq PCR Master Mix for PAGE | 5×1mL |
| HRF0027 | 2×HRbio PCR Master Mix(No Dye) | 1mL |
| HRF0028 | 2×HRbio PCR Master Mix(No Dye) | 5×1 mL |
| HRF0028L | 2×HRbio PCR Master Mix(No Dye) | 100×1 mL |
| HRF0029 | 2×HRbio™ PCR Master Mix (Green) | 1mL |
| HRF0030 | 2×HRbio™ PCR Master Mix (Green) | 5×1 mL |
| HRF0030L | 2×HRbio™ PCR Master Mix (Green) | 100×1 mL |
| HRF0031 | HRbio™ qPCR SYBR® Green Master Mix (No Rox) | 1mL |
| HRF0032 | HRbio™ qPCR SYBR® Green Master Mix (No Rox) | 5×1mL |
| HRF0033 | HRbio™ qPCR SYBR® Green Master Mix (No Rox) | 50×1mL |
| HRF0041 | HRbio™ qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox Plus) | 1mL |
| HRF0042 | HRbio™ qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox Plus) | 5×1mL |
| HRF0043 | HRbio™ qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox Plus) | 50×1mL |
| HRF0051 | HRbio™ qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox Plus) | 1mL |
| HRF0052 | HRbio™ qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox Plus) | 5×1mL |
| HRF0053 | HRbio™ qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox Plus) | 50×1mL |
| HRF0061 | HRbio™ Universal qPCR SYBR Green Master Mix | 1mL |
| HRF0062 | HRbio™ Universal qPCR SYBR Green Master Mix | 5×1mL |
| HRF0063 | HRbio™ Universal qPCR SYBR Green Master Mix | 50×1mL |
| HRF0071 | HRbio™ Probe qPCR Mix hUDG热启动探针法定量PCR Mix（含抗体修饰热启动酶 +hUDG） | 500T |
| HRF0081 | HRbio™ Hi-Fi High Fidelity DNA Polymerase高保真DNA聚合酶 | 10U |
| HRF0082 | HRbio™ Hi-Fi High Fidelity DNA Polymerase高保真DNA聚合酶 | 100U |
| HRF0083 | HRbio™ Hi-Fi High Fidelity DNA Polymerase高保真DNA聚合酶 | 500U |
| HRF0084 | HRbio™ Hi-Fi High Fidelity DNA Polymerase高保真DNA聚合酶 | 1000U |
| HRF0085 | Profusion™ DNA Polymerase 超高保真DNA聚合酶 | 100U |
| HRF0086 | Profusion™ DNA Polymerase 超高保真DNA聚合酶 | 500U |
| HRF0087 | Profusion™ DNA Polymerase 超高保真DNA聚合酶 | 1000U |
| HRF0088 | 2×Profusion™ PCR Master Mix 超高保真酶预混液 | 1mL |
| HRF0089 | 2×Profusion™ PCR Master Mix 超高保真酶预混液 | 5×1mL |
热门标签：PCR试剂盒,荧光定量PCR试剂盒,DNA聚合酶
