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人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]说明书
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 9:31:49
产品摘要：人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]说明书对于悬浮细胞传代方法：方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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详细内容
注意事项：
1. 收到人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]说明书 后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
细胞名称 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]说明书
细胞名称 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]说明书
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞由E.V. Gaffney及其同事从一位没有乳癌家族史的供者乳汁中建立，培养出来的细胞染色体组型在第7代时就不正常；电镜照片显示有微丝、张力原纤维和桥粒；Southern转移表明有整合型SV40病毒基因，不可以当作正常细胞。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法
传代情况 C4
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
【培养指南】
人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]说明书待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]说明书快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞培养的优点：1.人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]说明书研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
实验报告：
一、人整合SV40基因的乳腺上皮细胞；HBL-100 [HBL100]说明书分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
L-HISTIDINEMONOxy7noCHLORIDEMONOHYDRATEL-组酸盐酸盐美国食品化学品法典级白色粉末RTsigma
141⁻⁷9⁻⁷异亚丙基MESITYL OXIDE
TTHA三乙四胺六乙酸0.5毫升BR，1Mm/L
本骈三氮坐 1H-Bqnzotriczolq 92-14⁻⁷
N-乙基顺丁希二酰亚胺shēng huà shì jì容量：25克
基甲酰，英文名或英文缩写：Semicarbazide，级别：CP，规格：10克
9007-92-5胰高血糖素(2-8°C)GLUCAGON xy7noCHLORIDE(HUMAN)
2,6-Dimetxyl-4-(4,4,5,5-tetrametxyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)-36 1005397-65-8
烯丙基五苯 Allylpentafluorobenzene,99% 1736-60-3 5G 表面活性剂
缓冲液 PH10.00 Nc
碱性琼脂平板shēng huà shì jì容量：5克
RNaseInhibitor 2500u/1000u Promega原/CNI分装
硅胶板H500毫克2～8℃
5-溴-4-录-3-吲哚鳞醋酯队本安盐 (BCIP)(-20℃) 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphctq p-toluidinq sclt 6278-6-9
FMOC-L-谷酰胺25克
抗生素检定培养基6.5-6.7)250g用于药品抗生素效价测定
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EC-MUG培养基 100g 用于多管发酵法测定生活饮用水及其水源水中的大肠埃希氏菌(GB/T5750.12-2006)。
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