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植物内质网膜蛋白提取试剂盒-非酶法
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详细内容
内质网存在于除哺乳动物成熟的红细胞外的各种真核细胞中。内质网为由生物膜构成的互相通连的片层隙状或小管状系统,膜片间的隙状空间称为池,通常与细胞外隙和细胞浆基质之间不直接相通。这种细胞内的膜性管道系统一方面构成细胞内物质运输的通路,另方面为细胞内各种各样的酶反应提供广阔的反应面积。内质网的功能与蛋白质的合成、糖类和脂类的合成、解毒、同化作用有关,并且还具有运输蛋白质的功能。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 植物内质网膜蛋白提取试剂盒-非酶法 | Plant endoplasmic reticulum Extraction Kit | 50T|100T |

植物内质网膜蛋白提取试剂盒用简便快速的方法可以从各种植物样本中提取内质网膜蛋白,提取过程简单方便,可在一小时内提取得到高质量的内质网膜蛋白。本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解膜组份。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分,不可直接用于2D电泳,如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳,请使用我公司其他货号的试剂盒。也可以将后样品除盐后再用于2D电泳,用脱盐柱脱盐处理(相关产品HR0389)。
本试剂盒采用非酶法提取,提取过程简单方便,速度快,可在1小时内完成,但是蛋白回收率和纯度相比酶法较低。酶法提取制备的蛋白纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染,但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒,可以选择非酶法的提取试剂盒,对提取速度没有要求的话,可以选择酶法提取试剂盒(相关产品HR8061)。
储存条件:蛋白提取液、溶解液2-8℃保存;蛋白酶抑制剂-20℃保存。
效期:一年。
2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose 中文名:N-乙酰氨基葡萄糖 分子式:C8H15NO6 度:99.0% 小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒
2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoqui 中文名:2-氨基-3-氯-1,4-萘醌 分子式:C10H6ClNO2 度:99.0% 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISAKit
2-Amino-6-chlorobenzothiazole 中文名:2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 度:99.0% 小鼠上腺素(EPI)ELISAKit
Solvent Yellow 3 中文名:溶剂黄 分子式:C14H15N3 度:99.0% 小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISAKit
3-Acetylcoumarin 中文名:3-乙酰基 分子式:C11H8O3 度:99.0% 小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit
二苯砜(标准品) Diphenyl sulfone 质量规格:分析标准品,>99.5% 大鼠(T)ELISA检测试剂盒RatTestoterone,TELISAKit 96T/48T
乐果(标准品) Dimethoate 质量规格:分析标准品,99.3% 人端粒酶(TE)试剂盒 Human telomerase,TE ELISA Kit
三氯杀螨醇标准溶液(100μg/ml,u=5%) Dicofol standard solution 质量规格:100μg/ml,u=5% RatMothersagainstdecapeaplegichomolog1,Smad1ELISAKit大鼠Smad1ELISA试剂盒规格:96T/48T
三氯杀螨醇标准溶液(10μg/ml,u=6%) Dicofol standard solution 质量规格:10μg/ml,u=6% DNA损伤彗星中性检测完全试剂盒(银染)20
烯唑醇(标准品) Diniconazole 质量规格:分析标准品,99.5% MousePlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISA试剂盒小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
二乙二醇(标准品) Diethylene glycol 质量规格:分析标准品 小鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒 ,英文名: OVA sIgG ELISA Kit
二乙二醇(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Diethylene glycol 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 大鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA检测试剂盒RatDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISAKit 96T/48T
十二醇(标准品) 1-Dodecanol 质量规格:Standard for GC,>99%(GC) 人端粒保护蛋白1(POT1)试剂盒 Human POT1 ELISA kit
直接蓝6(标准品) DIRECT BLUE 6 质量规格:分析标准品 RatMothersagainstdecapeaplegichomolog7,Smad7ELISAKit大鼠Smad7ELISA试剂盒规格:96T/48T
分散橙37(标准品) Disperse Orange 37 质量规格:分析标准品 DNA损伤彗星中性检测完全试剂盒(荧光染色)20
植物内质网膜蛋白提取试剂盒-非酶法绞股蓝皂苷 UV≥98% 20mg ELISAKitf-Hb人游离血红蛋白规格:48T/96T
绞股蓝皂苷A HPLC≥98% 20mg ELISAKitFibrin人血纤蛋白规格:48T/96T
绞股蓝皂苷XLIX HPLC≥98% 10mg ELISAKitfibromodulin人纤调蛋白规格:48T/96T
介芬胺 HPLC≥98% 20mg ELISAKitFK506人他克莫司规格:48T/96T
金刚烷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitFN人纤连蛋白规格:48T/96T
金合欢素 HPLC≥98% 20mg ELISAKitFPA人血纤肽/纤维蛋白肽A规格:48T/96T
金雀花碱 HPLC≥98% 20mg ELISAKitFPB人血纤肽/纤维蛋白肽B规格:48T/96T
金色酰胺醇酯 HPLC≥98% 5mg ELISAKitFPB人血纤肽/纤维蛋白肽B规格:48T/96T
金石蚕苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitfPSA人游离列腺特异性抗原规格:48T/96T
金丝桃苷 HPLC≥98% 20mg ELISAKitFP-S人游离蛋白S规格:48T/96T
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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