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膜/胞浆/核蛋白分步提取试剂盒
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详细内容
膜蛋白/胞浆蛋白/核蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织,如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中分步提取膜蛋白/胞浆蛋白/核蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 膜/胞浆/核蛋白分步提取试剂盒 | Membrane / cylasm / nucleoprotein stepwise Extraction Kit | 50T|100T |

储存条件:蛋白酶抑制剂-20℃保存;磷酸酶抑制剂2-8℃保存;蛋白提取液2-8℃保存。
有效期:一年。
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品特点:
1.使用方便,从细胞,组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等处理。
2.将蛋白提取的时间缩短至 30分钟-1小时。
3.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
4.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
5.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱,冰盒
使用注意事项:
1.旋帽离心管装的试剂在开盖请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
Ethyl rutinoside 中文名:芸香糖乙苷 分子式:C14H26O10 度:98.0% 兔子催乳素elisa试剂盒 兔子催乳素试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子催乳素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔子催乳素试剂盒、兔子催乳素elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
18-Hydroxytritriacontan-16-one 中文名: 分子式:C33H66O2 度:98.0% 兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒
Mannitol 中文名:甘露醇 分子式:C6H14O6 度:98.5% 兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒
Phomaligol A 中文名: 分子式:C14H20O6 度:% 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒
ucralose 中文名:三氯蔗糖 分子式:C12H19Cl3O8 度:99.0% 兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒
2-氟-1,3-二甲基氯化咪唑翁六氟酯(DFIH) 2-Fluoro-1,3-dimethylimidazolidinium hexafluorophosphate 质量规格:>98%,BR 人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA检测试剂盒Humanβ-galactosidase,βGALELISAKit 96T/48T
肥胖抑制素(大鼠) OBESTATIN (RAT) 质量规格:>97%,BR 大鼠血管紧张素转化酶(ACE)试剂盒 Rat Angiotensin conveing enzyme,ACE ELISA Kit
苄索氯铵 Benzethonium Chloride 质量规格:>97% 英文名称RatinhibinBELISAKit大鼠抑制素B(INHB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
β-淀粉样蛋白(1-42),大鼠 β-Amyloid Peptide (1-42), rat 质量规格:>95%,BR 元素检测样品处理试剂盒20
血管紧张素I Angiotensin I human acetate salt hydrate 质量规格:>97%,BR,人,醋酸盐 ELISAKitHBsAg人乙型肝炎表面抗原规格:48T/96T
血管紧张素III Angiotensin III,human 质量规格:>97%,BR 小鼠结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒 ,英文名: CTGF ELISA Kit
蜂毒明肽; 蜂针液明肽 Apamin 质量规格:BR,>97% 大鼠游离列腺特异性抗原(fPSA)ELISA检测试剂盒RatFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit 96T/48T
枸橼酸氯米芬,克罗米芬 Clomiphene 质量规格:>98%,BR 人促肾上腺皮质激素(ACTH)试剂盒 Human adrenocoicoopic hormone,ACTH ELISA kit
ML-176;SR-3335 SR3335;ML176 质量规格:>98% RatSolubleClusterofdiffereiation30ligand,sCD30LELISAKit大鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Semaxanib(SU-5416 ) SU5416 质量规格:>98%,VEGFR(Flk-1/KDR)抑制剂 HRP底物TMB缓冲溶液100毫升
膜/胞浆/核蛋白分步提取试剂盒反式玉米素葡萄糖苷 trans-Zeatin glucoside 质量规格:美国进口 载玻片细胞DHPR受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
顺式玉米素 cis-Zeatin 质量规格:美国进口 载玻片细胞EGFR蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
反式-盐酸玉米素 trans-Zeatin 质量规格:美国进口 载玻片细胞ERBETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
齐留通-d4 Zileuton-d4 质量规格:美国进口 载玻片细胞ERK蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
去甲基盐酸氧氟沙星 Desmethyl Ofloxacin 质量规格:美国进口 载玻片细胞FSH-BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
氧氟沙星N-氧化物醋酸盐(非对映) Ofloxacin N-Oxide Acetic Acid Salt (Mixture of Diastereomers) 质量规格:美国进口 载玻片细胞GSK-3ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
盐酸阿巴卡韦 Abacavir 质量规格:美国进口 载玻片细胞GSK-3BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
硫酸阿巴卡韦 Abacavir Sulfate 质量规格:美国进口 载玻片细胞HISTONEH3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
阿巴卡韦羧化物 Abacavir Carboxylate 质量规格:美国进口 载玻片细胞IGF蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
阿巴卡韦5'-盐 Abacavir 5'-Phosphate 质量规格:美国进口 载玻片细胞IKB-ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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