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5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(25%甘油)
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详细内容
本产品作为蛋白质电泳Loading Buffer,适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳时的蛋白样品制备和上样。蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE loading buffer)是一种以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液,用于常规的SDS-PAGE蛋白电泳样品上样。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(25%甘油) | 5×SDS-PAGE loading buffer(With 25% Glycerol) | 1ml |
操作步骤
1. 按每4 微升蛋白样品加入1 微升5×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。
2. 100℃或沸水浴加热5 分钟,以充分变性蛋白。
3. 置冰上5 分钟,10000rpm 离心1 分钟,取上清直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。
储存:2~8℃,有效期12个月。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
Rhein 478-43-3 中文名:大黄酸 分子式:C15H8O6 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
2-Methylanthraqui 84-54-8 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2 Human adenosine three phosphate binding cassette anspoer A1 (ABCA1) ELISA Kit 人腺苷三0酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒
1-Hydroxy-2-methylanthraqui 6268/9/3 中文名:1-羟基-2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O3 Humanypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Anthraglycoside B 23313-21-5 中文名:大黄素-8-O-葡萄糖苷 分子式:C21H20O10 HumanDopamineD1receptor,D1RELISA试剂盒人多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Torososide A 165689-32⁻⁷ 中文名: 分子式:C38H32O15 组织NAD依赖性甘油-3-0酸脱氢酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光谱法定量检测试剂盒20次
5,10-二氢-5,10-二甲基吩嗪(>98.0%(GC)(N)) 5,10-Dihydro-5,10-dimethylphenazine 质量规格:>98.0%(GC)(N) 人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA检测试剂盒HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 96T/48T
双(羰基二硫代)四硫富瓦烯(>95.0%(W)) Bis(carbonyldithio)tetrathiafulvalene 质量规格:>95.0%(W) 大鼠列腺素E2(PGE2)试剂盒 Rat Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit
1,2-苯二硫醇(>95.0%(GC)) 1,2-Benzenedithiol 英文名称RatTG-AbELISAKit大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
4,5-双(甲硫代)-1,3-二硫醇-2-酮(>98.0%(GC)) 4,5-Bis(methylthio)-1,3-dithiol-2-one 胶原酶潜酶活化剂(APMA)500微升
二巯基马来腈二钠(>90.0%(N)) Di Dimercaptomaleonitrile 质量规格:>90.0%(N) ELISAKitVD人维生素D规格:48T/96T
4,5-亚乙基二硫代-1,3-二硫醇-2-硫酮(>98.0%(GC)) 4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiole-2-thione 小鼠多萜长醇二0酸寡糖蛋白环糊精糖基转移酶(DDOST/OST-48)ELISA试剂盒 ,英文名: DDOST/OST-48 ELISA Kit
4,5-乙撑二硫代-1,3-二硫酚-2-酮(>98.0%(GC)) 4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiol-2-one 大鼠Ⅳ型胶原(ColⅣ)ELISA检测试剂盒RatCollageypeⅣ,ColⅣELISAKIT 96T/48T
4,5-甲二硫基-1,3-二硫醇-2-酮(>95.0%(HPLC)) 4,5-Methylenedithio-1,3-dithiol-2-one 质量规格:>95.0%(HPLC) 人白介素1β体(pro-IL1B)试剂盒 Human pro ierleukin 1 beta,pro-IL1B ELISA Kit
3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC)) 3,3'-Bithiophene 英文名称MouseLaminaPropriaLymphocyteELISAKit小鼠脂蛋白脂酶(LPL)规格:96T/48T
2,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC)) 2,1,3-Benzothiadiazole PH4-5显色(BROMOCRESOLGREEN)指示溶液50毫升
5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(25%甘油)D-酪氨酸 D-Tyrosine 质量规格:>98%,BR 人干细胞因子受体(SCFR)试剂盒 Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA kit
D-组氨酸 D-Histidine 质量规格:>98%,BR 人刚地弓形虫(T.gondii)试剂盒 Human Toxoplasma Gondii,T.gondii ELISA Kit
D-丙氨酸甲酯盐酸盐 D-Alanine Methyl Ester 质量规格:0.98 人高半胱氨酸(Hcy)试剂盒 Human Homocysteine,HCY ELISA Kit
D-丙氨酸叔丁酯盐酸盐 D-Alanine tert-Butyl Ester 质量规格:0.99 人高尔基蛋白73(GP⁻⁷3)试剂盒 Human GP⁻⁷3 ELISA Kit
D-精氨酸 D-Arginine 质量规格:0.98 人高尔基体抗体(AGAA)试剂盒 Human ai-golgi apparatus aibody,AGAA ELISA Kit
非对称二甲基精氨酸 ADMA 质量规格:>98%,盐酸盐形式,美国进口 人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)ELISA检测试剂盒HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit 96T/48T
N'-硝基-D-精氨酸 N'-Nitro-D-arginine 质量规格:0.98 人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)试剂盒 Human cytokeratin High Molecular Weight,CK-HMW ELISA Kit
D-天冬酰胺,一水 D-Asparagine monohydrate 质量规格:0.99 人高分子量脂联素(HMW Adiponectin)试剂盒 Human High Molecular Weight Adiponectin,HMW Adiponectin ELISA Kit
D-天冬氨酸 D-Aspartic acid 质量规格:0.98 人高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)试剂盒 human ulasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit
D-天冬氨酸4-叔丁酯 D-Aspartic acid 4-tert-butyl ester 质量规格:0.98 人高密度脂蛋白(HDL)ELISA检测试剂盒HumanHighdensitylipoprotein,HDLELISAKit 96T/48T
热门标签:5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(25%甘油)













