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Western半干转转膜液
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详细内容
本Western半干法转膜液是一种安全无毒的转膜液,没有使用剧毒的甲醇,也没有使用其它的有毒试剂。配制Western 半干法转膜液的方法非常便捷,不需要调节pH值。本Western转膜液共1瓶,可以配制1升1×Western半干转膜液,用于Western时半干法电转膜。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| Western半干转转膜液 | Western semi dry membrane fluid | 10×1L |
使用方法:
1、取一瓶可以配制1升Western转膜液的粉剂,倒入到一洁净的烧杯中,加入蒸馏水到约700毫升,溶解。
2、再加入200毫升无水乙醇或210毫升95%乙醇,混匀。
3、然后在量筒中用蒸馏水定容到1升。混匀后即可使用,无需调节pH值。没有用完的转膜液可室温或4℃保存,通常两周内使用没有任何问题。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时,应该丢弃。
注意事项:
1、配制好的半干法转膜液可室温或4℃保存。配制好的半干法转膜液长期存放后,如果颜色变成浅棕色或黄褐色,应丢弃。
2、需使用分析纯别的乙醇或纯度更高的乙醇。
储存条件:室温,有效期2年。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 1265908-20-0 中文名: 分子式:C28H40O3 兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Schleicheol 1 256445-66-6 中文名: 分子式:C30H52O2 Human thymus leukemia aigen (TLa) ELISA Kit 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA试剂盒
Uzarigenin digitaloside 61217-80-9 中文名: 分子式:C30H46O8 Humanpunjecellaoaibody,PCA-1/YoELISAKit 人抗浦肯野细胞抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Daturametelin I 904667-65-8 中文名: 分子式:C34H48O10 humanEndothelin1,ET-1ELISA试剂盒人内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
6-O-Methylcerevisterol 126060-09-1 中文名: 分子式:C29H48O3 组织PKCδ激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
二苯并-15-冠5-醚(>95.0%(GC)) Dibenzo-15-crown 5-Ether 大鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA检测试剂盒RatN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 96T/48T
二苯并-21-冠7-醚(>96.0%(GC)) Dibenzo-21-crown 7-Ether (GC) 人白介素11(IL-11)试剂盒 Human Ierleukin 11 ELISA KIT
4'-甲酰苯并-15-冠-5-醚(>98.0%(GC)) 4'-Formylbenzo-15-crown 5-Ether 英文名称MouseacetylcholinereceptoraibodyELISAKit小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)规格:96T/48T
4'-甲酰苯并-18-冠-6-醚(>98.0%(GC)) 4'-Formylbenzo-18-crown 6-Ether PP2A蛋白共沉淀分析试剂盒5
4,7,13,21,24-六氧杂-1,10-二氮杂双环[8,8,8]-二十六烷(>98.0%(GC)(T)) 4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane 质量规格:>98.0%(GC)(T) Rabbitadramycin,ADRELISA试剂盒兔阿霉素(ADR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
2-(羟甲基)-12-冠4-醚(>95.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-12-crown 4-Ether 小鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA 试剂盒
2-(羟甲基)-15-冠5-醚(>96.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-15-crown 5-Ether (GC) Rat urokinase (UK) ELISA Kit 大鼠尿激酶(UK)ELISA试剂盒
2-(羟甲基)-18-冠6-醚(>93.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-18-crown 6-Ether 质量规格:>93.0%(GC) HumanHerpessimplexvirusⅠaibody,HSVⅠ-AbELISAKit 人单疱疹病毒Ⅰ型抗体(HSVⅠ-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
1,4,8,11-四氮杂环十四烷(>98.0%(T)) 1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane 质量规格:>98.0%(T) HumanAspaateaminoansferase,GOT/GPTELISA试剂盒人天门冬氨酸转氨酶/谷草转氨酶(GOT/GPT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
1,4,7-三氮杂环壬烷三盐酸盐(>98.0%(N)(T)) 1,4,7-Triazacyclononane Tri 质量规格:>98.0%(N)(T) 植物源性食品山核桃(pecan)试剂盒20
Western半干转转膜液AV-951 Tivozanib, AV951 质量规格:>98%,VEGFR抑制剂 小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA检测试剂盒MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit 96T/48T
7,8-二氢生物蝶呤 7,8-Dihydro-L-biopterin 质量规格:HPLC>95%,BR 小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA检测试剂盒MouseC-ReactiveProtein,CRPELISAKit 96T/48T
整形素 Chlorflurenol-methyl 质量规格:>90%,BR 小鼠C型尿肽(CNP)ELISA检测试剂盒MouseC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit 96T/48T
帕拉米韦三水合物 Peramivir Trihydrate 质量规格:>98%,BR 小鼠ELISA试剂盒
神经保护剂NXY059 NXY-059,Cerovive 质量规格:>95%,BR 小鼠E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA检测试剂盒MouseE-Cadherin,E-CadELISAKit 96T/48T
L-犬尿氨酸(标准品) L-Kynurenine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA检测试剂盒MouseE-SelectinELISAkit 96T/48T
磺胺二甲氧嗪; 磺胺二甲氧基嘧啶 Sulfadimethoxine 质量规格:>99%,AR 小鼠FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA检测试剂盒MouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKit 96T/48T
磺胺二甲氧基嘧啶(标准品) Sulfadimethoxine 质量规格:HPLC>98%,标准品 小鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA检测试剂盒MouseFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 96T/48T
奥斯他伟酸;奥司他韦羧酸 Oseltamivir acid 质量规格:>97,BR 小鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA检测试剂盒MouseL-SelectinELISAkit 96T/48T
alpha-熊果苷(标准品) alpha-Arbutin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA检测试剂盒MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit 96T/48T
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