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SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 9:52:37
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详细内容
?本产品为配制SDS-PAGE浓缩胶缓冲液，可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶，方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×) | SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×) | 200ml |
操作步骤：
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，佳胶浓度请参考附表1。
I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
注：加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触，是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel，凝胶液加至约距玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可)， 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%过硫酸铵和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
6、静置10~20分钟，等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
储存条件：2～8℃
血红素(>95%,BR) Hematin 质量规格：>95%,BR 动物源性食品山羊源试剂盒20
聚乙二醇800 PEG 800 质量规格：BR 动物源性食品鼠源试剂盒20
炔雌醚;炔雌醇环戊醚 Quinestrol 质量规格：USP 动物源性食品鸭源试剂盒20
二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC) Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom 质量规格：比活度：>20 U/mg，BC 动物源性食品羊源试剂盒20
化丙啶(>95% (HPLC),BC) Propidium iodide 质量规格：>95% (HPLC),BC 动物源性食品猪源试剂盒20
十二烷基苯磺酸钠(>95%,Tech Grade) dodecylbenzenesulfonate 质量规格：>95%,Tech Grade 动物源性饲料牛源试剂盒20
硅酸钠九水(>98%，BR) silicate hydrate 质量规格：>98%，BR 动物源性饲料羊源试剂盒20
5－－3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR) Bluo-Gal 质量规格：>98%,BR 动物源性饲料样品处理试剂盒20
氢二钠二水 Di hydrogen phosphate dihydrate 质量规格：>99%,BR 动物脂肪组织细胞分离培养试剂盒10
中性蛋白酶 Neutral Protease from Bacillus polymyxa 质量规格：酶活：20万u/g 动物直肠组织细胞分离培养试剂盒10
动物细胞/组织线粒体超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分离试剂盒50 3-(环己氨基 )-1-丙磺酸钠(分子生物学) CAPS, salt 质量规格：>99%,分子生物学
动物源性食品山羊源试剂盒20 血红素(>95%,BR) Hematin 质量规格：>95%,BR
动物源性食品鼠源试剂盒20 聚乙二醇800 PEG 800 质量规格：BR
动物源性食品鸭源试剂盒20 炔雌醚;炔雌醇环戊醚 Quinestrol 质量规格：USP
动物源性食品羊源试剂盒20 二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC) Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom 质量规格：比活度：>20 U/mg，BC
动物源性食品猪源试剂盒20 化丙啶(>95% (HPLC),BC) Propidium iodide 质量规格：>95% (HPLC),BC
动物源性饲料牛源试剂盒20 十二烷基苯磺酸钠(>95%,Tech Grade) dodecylbenzenesulfonate 质量规格：>95%,Tech Grade
动物源性饲料羊源试剂盒20 硅酸钠九水(>98%，BR) silicate hydrate 质量规格：>98%，BR
动物源性饲料样品处理试剂盒20 5－－3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR) Bluo-Gal 质量规格：>98%,BR
动物脂肪组织细胞分离培养试剂盒10 氢二钠二水 Di hydrogen phosphate dihydrate 质量规格：>99%,BR
SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)0.2摩尔基质金属蛋白酶2/9抑制剂卡托普利(capril)1毫升 左旋肉碱 HPLC≥98% 20mg
MouseBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISA试剂盒小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒规格：96T/48T Ophiopojaponin C HPLC≥98% 5mg
小鼠野鼠色基因相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒 ，英文名： AGRP ELISA Kit Cyclocephaloside II HPLC≥98% 5mg
兔子促甲状腺素(TSH)ELISA检测试剂盒rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 96T/48T Hydroxy Sprengerinin C, HPLC≥98% 10mg
犬雌二醇(E2)试剂盒 Canine Esadiol,E2 ELISA Kit Tokinolide B HPLC≥98% 10mg
英文名称HumanGlycogenphosphorylaseMMELISAKit人糖原0酸化酶同工酶MM(GPMM)规格：96T/48T Raddeanoside HPLC≥98% 5mg
大麦β-淀粉酶活性PNPG5酶偶联比色法定量检测试剂盒20 ()薄荷酮 GC≥98% 20mg
RatLDL-ICELISA试剂盒大鼠低密度脂蛋白复合物(LDL-IC)ELISA试剂盒规格：96T/48T (+)儿茶素 HPLC≥98% 20mg
小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)ELISA试剂盒 ，英文名： KLH ELISA Kit (+)松萝酸钠 HPLC≥98% 20mg
小鼠阿立新A(OrexinA)ELISA检测试剂盒MouseOrexinAELISAKit 96T/48T (R型)人参皂苷Rg HPLC≥98% 20mg
产品仅用于科研操作程序：
注意：重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20－－30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。
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