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详细内容
本试剂盒应用于组织样本的总蛋白提取。提取蛋白之可根据具体实验需要加入蛋白酶抑制剂、盐、还原剂、螯合剂等成分。使用该提取液提取的组织蛋白,可进行蛋白活性分析、免疫检测、蛋白纯化等下游操作,并可采用BCA、Bradford、Lowry法进行蛋白定量。试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物,可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 组织蛋白抽提试剂盒 | Tissue Protein Extraction Kit | 25次|100次 |
试剂盒组成:
组份 25次
Tissue Protein Extraction Reagent 25ml
Protease Inhibitor Cocktail 250μl
保存条件:Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温
注意事项:
1、本产品适用于提取心肌、骨骼肌、肾脏、列腺、皮肤、结肠、肝脏等软组织。
2、为防止蛋白降解,所有的操作尽量在冰上进行。
3、使用本产品提取蛋白后,可采用BCA、Bradford、Lowry法进行蛋白定量。
4、为了获得实验佳效果,请根据实验调整佳使用量。
使用方法:
1、请在实验取出Tissue Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、取适量Tissue Protein Extraction Reagent,抽提蛋白2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail,即1×工作液。
3、1 g组织加入10ml 1×工作液匀浆处理(抽提试剂的使用量可根据组织不同而调整)。若需要浓缩的蛋白提取物,可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
4、冰上孵育20分钟(冰上放置时间可根据组织不同而调整)。
5、10000×g 离心15-20分钟。
6、转移上清至新管中,进行下一步的蛋白含量测定、纯化及分析。
储存条件:-20℃
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
盐酸艾司洛尔(标准品) Esmolol HCl 质量规格:>98%,标准品 人骨退化特异标志物(CTX-2)试剂盒 Human CTX-2 ELISA Kit
盐酸艾司洛尔 Esmolol HCl 质量规格:>99%,BR 人骨涎蛋白(BSP)试剂盒 Human bone sialoprotein,BSP ELISA Kit
H-Met-OtBu.HCL H-Met-OtBu·HCl 质量规格:0.98 人骨形成蛋白4(BMP4)试剂盒 Human BMP4 ELISA Kit
麦芽糖醇 Maltitol 质量规格:>98% 人骨形成蛋白6(BMP-6)试剂盒 Human BMP-6 ELISA Kit
L-苏氨酸甲酯盐酸盐 L-Threonine methyl ester 质量规格:0.98 人骨织素(Ostn)试剂盒 Human osteocrin,Ostn ELISA kit
N-乙酰-L-色氨酸乙酯 Ac-Trp-Oet 质量规格:HPLC>98%,BR 人瓜氨酸试剂盒 Human Ciulline ELISA Kit
N-乙酰-DL-色氨酸 N-Acetyl-DL-tryphan 质量规格:0.98 人胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)试剂盒 Human AGMAT ELISA Kit
N-甲酰-DL-色氨酸 Nalpha-Formyl-DL-tryphan 质量规格:0.98 人寡聚蛋白(oligomeric)ELISA检测试剂盒HumanoligomericproteinELISAKit 96T/48T
L-酪氨酸叔丁酯 L-Tyrosine tert-butyl ester 质量规格:>98%,BR 人胱硫醚β-合酶(CBS)试剂盒 Human cystathionine β-syhase,CBS ELISA Kit
O-苄基-L-酪氨酸 O-Benzyl-L-tyrosine 质量规格:0.98 人胱天蛋白酶1(Casp-1)试剂盒 Human Caspase 1,Casp-1 ELISA Kit
人骨桥素(OPN)试剂盒 Human Osteopoin,OPN ELISA Kit L-谷氨酸5乙酯 H-Glu(OEt)-OH 质量规格:0.985
人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)试剂盒 Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 ELISA Kit N-乙酰-DL-亮氨酸 N-Acetyl-DL-leucine 质量规格:0.98
人骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)试剂盒 Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA Kit N-碳苄氧基赖氨酸,N6-Cbz-L-赖氨酸 N6-Cbz-L-Lysine 质量规格:98%,BR
人骨退化特异标志物(CTX-2)试剂盒 Human CTX-2 ELISA Kit 盐酸艾司洛尔(标准品) Esmolol HCl 质量规格:>98%,标准品
人骨涎蛋白(BSP)试剂盒 Human bone sialoprotein,BSP ELISA Kit 盐酸艾司洛尔 Esmolol HCl 质量规格:>99%,BR
人骨形成蛋白4(BMP4)试剂盒 Human BMP4 ELISA Kit H-Met-OtBu.HCL H-Met-OtBu·HCl 质量规格:0.98
人骨形成蛋白6(BMP-6)试剂盒 Human BMP-6 ELISA Kit 麦芽糖醇 Maltitol 质量规格:>98%
人骨织素(Ostn)试剂盒 Human osteocrin,Ostn ELISA kit L-苏氨酸甲酯盐酸盐 L-Threonine methyl ester 质量规格:0.98
人瓜氨酸试剂盒 Human Ciulline ELISA Kit N-乙酰-L-色氨酸乙酯 Ac-Trp-Oet 质量规格:HPLC>98%,BR
人胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)试剂盒 Human AGMAT ELISA Kit N-乙酰-DL-色氨酸 N-Acetyl-DL-tryphan 质量规格:0.98
组织蛋白抽提试剂盒犬多肽YY(PYY)试剂盒 Dog Peptide YY,PYY ELISA kit 异银杏双黄酮 HPLC≥98% 20mg
英文名称HumanmicroalbunminuriaELISAKIT人微量白蛋白尿(ALB)规格:96T/48T 异泽兰黄素 HPLC≥98% 20mg
大量腺病毒氯化铯化试剂盒5 异紫花胡内酯 HPLC≥98% 10mg
RatIerleukin⁻⁷,IL⁻⁷ELISA试剂盒大鼠白介素7(IL⁻⁷)ELISA试剂盒规格:96T/48T 异紫堇定碱 HPLC≥98% 20mg
小鼠胰岛素样蛋白5(INSL5)ELISA试剂盒 ,英文名: INSL5 ELISA Kit 益母草苷 HPLC≥98% 20mg
兔子白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit 96T/48T 薏苡素 HPLC≥98% 20mg
犬胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)试剂盒 Canine cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISA Kit 茵芋苷 HPLC≥98% 20mg
英文名称HumanAOPPELISAKit人晚期氧化蛋白(AOPP)规格:96T/48T 茵芋碱 HPLC≥98% 20mg
大量腺病毒树脂法高化试剂盒1 羊藿苷I HPLC≥98% 20mg
Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA试剂盒大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 羊藿素 HPLC≥98% 20mg
热门标签:组织蛋白抽提试剂盒













