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一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(高pH)
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详细内容
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native PAGE)是目电泳法分离活性蛋白的主要方法之一,跟SDS-PAGE根据分子量大小分离蛋白质不同,它是根据蛋白质分子大小、形状、电荷密度三个主要参数分离蛋白质。由于蛋白质的pI各不相同,所以对不同蛋白质需要选用具有不同pH的电泳体系。单独配制不同pH的Native PAGE电泳胶十分繁琐,为此本公司开发了本产品。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(高pH) | One-S Protein Native PAGE Pack(A) | 30次 |
产品特点:
1.即开即用,不需单独准备各种成分,十分方便。还免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙烯酰胺
2.非变性,电泳过程中蛋白质保持天然的构象和亚基之间的相互作用,得到的蛋白质一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白没有活性)。
3.可用于分析蛋白质和DNA或RNA的相互作用、蛋白修饰、蛋白构型改变、回收有活性蛋白质等试验。
4.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
5.提供具有3种不同pH的缓冲液套装,便于客户选择适合的缓冲液体系。
储存条件:常温运输和保存(上样液需-20℃保存),保存期为一年。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
盐酸番茄碱 HPLC≥98% 20mg RatCiliaryNeuroophicFactor,CFELISAKit大鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
表戈米辛O HPLC≥98% 20mg RatCiliaryNeuroophicFactor,CFELISA试剂盒大鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
异鼠李素O槐二糖O鼠李糖苷 HPLC≥95% 20mg Ratc-junELISAKit大鼠c-junELISA试剂盒规格:96T/48T
山柰酚槐二糖鼠李糖苷 HPLC≥95% 20mg Ratc-junELISA试剂盒大鼠c-junELISA试剂盒规格:96T/48T
槲皮素O葡萄糖O鼠李糖苷 HPLC≥98% 20mg Ratc-JunN-terminalkinases,JNKELISAKit大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
异鼠李素O葡萄糖O鼠李糖苷 HPLC≥95% 20mg Ratc-JunN-terminalkinases,JNKELISA试剂盒大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
灵芝酸I HPLC≥98% 20mg RatClaracellprotein,CC16ELISAKit大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒规格:96T/48T
黄卡瓦胡椒素C HPLC≥95% 20mg RatClaracellprotein,CC16ELISA试剂盒大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒规格:96T/48T
β灵芝酸M HPLC≥95% 20mg RatClusterin,CLUELISAKit大鼠凝聚素(CLU)ELISA试剂盒规格:96T/48T
灵芝内酯B HPLC≥98% 20mg RatClusterin,CLUELISA试剂盒大鼠凝聚素(CLU)ELISA试剂盒规格:96T/48T
RatCiatesyhase,CSELISA试剂盒大鼠柠檬酸合酶(CS)ELISA试剂盒规格:96T/48T 醛基异麦冬黄烷酮A HPLC≥98% 20mg
RatCiliaryNeuroophicFactor,CF大鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA试剂盒规格:96T/48T 盐酸番茄碱 HPLC≥98% 20mg
RatCiliaryNeuroophicFactor,CFELISA试剂盒大鼠睫状神经营养因子(CF)ELISA试剂盒规格:96T/48T 表戈米辛O HPLC≥98% 20mg
Ratc-jun大鼠c-junELISA试剂盒规格:96T/48T 异鼠李素O槐二糖O鼠李糖苷 HPLC≥95% 20mg
Ratc-junELISA试剂盒大鼠c-junELISA试剂盒规格:96T/48T 山柰酚槐二糖鼠李糖苷 HPLC≥95% 20mg
Ratc-JunN-terminalkinases,JNK大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒规格:96T/48T 槲皮素O葡萄糖O鼠李糖苷 HPLC≥98% 20mg
Ratc-JunN-terminalkinases,JNKELISA试剂盒大鼠c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒规格:96T/48T 异鼠李素O葡萄糖O鼠李糖苷 HPLC≥95% 20mg
RatClaracellprotein,CC16大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒规格:96T/48T 灵芝酸I HPLC≥98% 20mg
RatClaracellprotein,CC16ELISA试剂盒大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒规格:96T/48T 黄卡瓦胡椒素C HPLC≥95% 20mg
RatClusterin,CLU大鼠凝聚素(CLU)ELISA试剂盒规格:96T/48T β灵芝酸M HPLC≥95% 20mg
一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(高pH)犬高迁移率族蛋白A1(HMGA-1)试剂盒 Canine high mobility group AT-hook 1,HMGA1 ELISA Kit 盐酸石蒜碱 HPLC≥98% 20mg
英文名称HumanCytochromeCELISAKit人细胞色素C(CytochromeC)规格:96T/48T 盐酸水苏碱 HPLC≥98% 20mg
大量蛋白样品树脂法去内试剂盒5 盐酸甜菜碱 HPLC≥98% 20mg
RatIerleukin3,IL-3ELISA试剂盒大鼠白介素3(IL-3)ELISA试剂盒规格:96T/48T 盐酸吐根酚碱 HPLC≥98% 10mg
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA试剂盒 ,英文名: IGFBP-6 ELISA Kit 盐酸拓扑替康 HPLC≥98% 20mg
小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)ELISA检测试剂盒Mousenuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit 96T/48T 盐酸小檗胺 HPLC≥98% 20mg
人离子通道蛋白抗体试剂盒 Human Voltage Gated Potassium Channel Aibody ELISA Kit 盐酸小檗碱 HPLC≥98% 20mg
RatAquaporin4,AQP-4ELISAKit大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 盐酸辛可宁 HPLC≥98% 20mg
组蛋白H3乙酰化检测试剂盒10/20等 盐酸药根碱 HPLC≥98% 20mg
Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISA试剂盒小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒规格:96T/48T 盐酸野靛碱 HPLC≥99% 20mg
热门标签:一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(高pH)













