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详细内容
使用本试剂盒,可一次性向目标质粒上三至五个不连续位点(相距超过50bp)同时引入定点突变。该试剂盒由两个模块组成:Pfu DNA Polymerase扩增模块和快速克隆模块。Pfu DNA Polymerase超高的保真度显著降低了扩增过程中引入新突变的可能性,其卓越的长片段扩增能力,广泛适用于长度小于20 kb的任何质粒扩增。快速克隆系统利用高效的同源重组反应替代传统的退火成环反应。因此使用本试剂盒进行DNA定点突变时,引物设计更加灵活,且扩增反应以指数方式进行,大减少了模板使用量,有利于原始甲基化模
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 多点突变试剂盒 | Multi Site-Directed Mutagenesis Kit | 10T |

本试剂盒中的重组酶Exnase MultiS经过优化,门针对多碱基进行定点突变。此外,如扩增产物特异,其DpnI消化产物可不进行DNA纯化而直接用于重组反应。高度优化的反应缓冲液、快捷的操作流程以及高的成功率,使得本产品成为DNA多点突变选试剂盒。
,十八烷二醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠小核糖核蛋白多肽D1(SPD1)ELISA试剂盒 ,英文名: SPD1 ELISA Kit
,:,二o异亚丙基betad吡喃果糖 HPLC≥98% 5mg 兔子脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA检测试剂盒deoxypyridinoline,DPDELISAKit 96T/48T
,O异亚丙基betaD吡喃果糖 HPLC≥98% 5mg 牛脂联素(ADP)试剂盒 Bovine adiponectin,ADP ELISA Kit
,,,四羟基苯基氧蒽酮 HPLC≥98% 5mg 英文名称HumanPlasminogenactivator,urokinase(PLAU,uPA)ELISAkit人尿激酶型血浆酶原激活因子(PA)规格:96T/48T
,,桉叶烷三醇 HPLC≥98% 5mg 蛋白样品多粘菌素层析法去内试剂盒20
,二噁螺[.]癸醇 HPLC≥98% 5mg Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISA试剂盒大鼠受体(M-AChR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
,二表,柏木烷二醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒 ,英文名: AFP-L3 ELISA Kit
()去氢腋生依瓦菊素 HPLC≥98% 5mg 小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA检测试剂盒Mouseadrenomedullin,ADMELISAKit 96T/48T
,二羟基贝壳杉烯酸 HPLC≥98% 5mg 人花生四烯酸(AA)试剂盒 Human Arachidonic Acid,AA ELISA Kit
Beta羟基洋椿苦素 HPLC≥98% 5mg RatCrosslaps,CrELISAKit大鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人多巴胺脱羧酶(DDC)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:Aromatic L-amino acid decarboxylase,AADC,AAAD,DOPA decarboxylase,tryphan decarboxylase,5-hydroxytryphan decarboxylase Human DDC(Dopamine Decarboxylase) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组DDC浓度
多点突变试剂盒人基质金属蛋白酶1(MMP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:MMP1, CLG, CLGN, Interstitial Collagenase, Fibroblast Collagenase Human MMP-1(Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组MMP-1浓度
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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