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动物组织直接PCR试剂盒
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详细内容
本产品是一款可直接对不同动物组织进行PCR扩增的试剂盒,适应性广、稳定性强、操作简易。可用于动物基因扩增检测、转基因动物基因型鉴定等。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 动物组织直接PCR试剂盒 | Animal Tissue Direct PCR Kit | 50T|200T |
本试剂盒采用独特的裂解缓冲液体系,可以快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组DNA,如昆虫足翅、鼠尾、鼠趾、动物皮肤和内脏等。裂解产物可以用于DNA提取纯化、也可以直接用于PCR反应、也可以在-20℃或以下温度条件下长期保存备用。
本试剂盒中提供的2×Tissue Direct PCR Mix (With Dye)具有很强的扩增兼容性,不需要额外采用纯化提取试剂去除裂解产物中的各种残骸杂质,能直接以待测样品裂解液为模板,进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合液,包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分,大大简化扩增步骤的操作过程,降低污染机率。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
山梨酸 HPLC≥99% 250mg 人解整合素样金属蛋白酶12(ADAM12)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 12,ADAM12 ELISA Kit
山麦冬皂苷B HPLC≥95% 20mg ratai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit大鼠抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
山羊豆碱 HPLC≥98% 20mg 组蛋白H2B-K16乙酰化检测试剂盒10/20等
山楂酸 HPLC≥98% 20mg MouseAndrostenedione,ASDELISA试剂盒小鼠雄烯二同(ASD)ELISA试剂盒规格:96T/48T
山栀苷 HPLC≥98% 20mg 小鼠游离状腺原酸(Free-T3)ELISA试剂盒 ,英文名: Free-T3 ELISA Kit
山栀苷甲酯 HPLC≥98% 20mg 小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA检测试剂盒Mousemyeloperoxidase-aineuophilcylasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T
山栀子苷B HPLC≥98% 20mg 人解整合素样金属蛋白酶10(ADAM10)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 10,ADAM10 ELISA Kit
山茱萸苷 HPLC≥98% 20mg Ratai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
山茱萸新苷 HPLC≥98% 20mg 组蛋白H2B-K46甲基化(di)检测试剂盒10/20等
山竹子素 HPLC≥95% 20mg MouseAngiopoietin4,ANG-4ELISA试剂盒小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人肌酸激酶同工酶MB(CKMB)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CK-MB Human CKMB(Creatine Kinase MB Isoenzyme) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组CKMB浓度
动物组织直接PCR试剂盒人10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP-10/CXCL10)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:C7, IFI10, INP10, SCYB10, crg-2, gIP-10, mob-1 Human IP-10/CXCL10(Interferon Gamma Induced Protein 10kDa) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组IP-10/CXCL10浓度
热门标签:动物组织直接PCR试剂盒













