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5×SYBR qPCR MasterMix
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详细内容
本制品是采用SYBR Green嵌合荧光法进行Real-Time PCR的用试剂,本SYBR Green qPCR Mix将抗体封闭的热启动Taq DNA聚合酶、反应Buffer、dNTP、SYBR Green染料等试剂预混在一起,是一种5×浓度的单组分预混试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单,只需加入引物、模板、水即可。本制品中含有ROX校正染料,适合于需要ROX校正和无需ROX校正的各种定量PCR机型。

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 5×SYBR qPCR MasterMix | 5×SYBR Green qPCR MasterMix | 250T|1000T|10000T |
本制品中的DNA聚合酶为抗体封闭的Hot Start Taq DNA聚合酶,该酶在50℃以下无活性,只有95℃条件下加热后才能完全恢复酶的活力。该试剂盒独特的反应缓冲液,可在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。
保存条件:请置于-20℃或⁻⁷0℃避光保存,有效期2年。
产品特点:
·热启动酶采用抗体封闭,100%热启动;
·单组份预混液,使用方便快捷;
·高特异性,有效抑制非特异性扩增;
·高灵敏度,可检测低丰度基因;
·适用于所有实时定量PCR仪器。
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
三氯蔗糖 HPLC≥98% 20mg 犬基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)试剂盒 Canine Maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit
三七素 HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanangiotensinogenELISAKit人血管紧张素原(aGT)规格:96T/48T
三七皂苷FC HPLC≥98% 20mg 化线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂盒20/200
三七皂苷Fe HPLC≥98% 20mg RatIerferonβ,IFN-β/IFNBELISA试剂盒大鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
三七皂苷Ft HPLC≥98% 20mg 小鼠原钙黏素15(PCDH15)ELISA试剂盒 ,英文名: PCDH15 ELISA Kit
三七皂苷R HPLC≥98% 20mg 猴载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA检测试剂盒MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T
三七皂苷R(R型) HPLC≥98% 20mg 犬基质金属蛋白酶13(MMP-13)试剂盒 Canine Maix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA kit
三七皂苷R(S型) HPLC≥90% 20mg 英文名称HumanAngiotensinIconveingenzymeELISAKit人血管紧张素I转化酶(ACE)规格:96T/48T
三七总皂苷 HPLC≥70% 20mg 化线粒体细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒20
三十烷醇 GC≥98% 20mg RatIerferonγ,IFN-γELISA试剂盒大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人肌肉肌酸激酶(CKM)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CKMM, M-CK, creatine kinase M chain|creatine kinase-M|muscle creatine kinase Human CKM(Creatine Kinase, Muscle) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组CKM浓度
5×SYBR qPCR MasterMix人褪黑素(MT)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:N-Acetyl-5-Methoxytryptamine Human MT(Melatonin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组MT浓度。
热门标签:5×SYBR,qPCR,MasterMix













