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详细内容
储存条件:冷冻(-20℃)

| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 高GC PCR扩增试剂盒 | GC-rich PCR Master Mix | 1mL|5×1mL |
概述
GC-rich PCR Master Mix(2X,without dye)是即用型产品,包含DNA酶,dNTP,MgSO4,GC-rich PCR buffer和灭菌水。加入模板,引物和水就可以建立完整的PCR反应体系。优化的GC-rich PCR Master Mix(2X,without dye)以人类血液基因组为模板,能够扩增出GC含量高达78%的目的片段。本产品推荐的反应体系内MgSO4的终浓度为2mM。如果发现PCR反应没有得到所需产物或条带较弱,建议用试剂盒中提供的25mM MgCl2调节反应体系中的Mg2+浓度,以期获得更好的结果。
特点
即用型的产品,门用于扩增结构比较复杂(如含有二结构及GC含量大于60%)的目的片段。
以人类血液基因组为模板,能够扩增出GC含量高达78%的目的片段。
适用于常规PCR。
稳定性好,-20℃可长期保存,不影响扩增效率。
应用
GC含量小于80%PCR扩增
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
白头翁素 HPLC≥98% 20mg 人抗促卵泡素抗体(Ai FSH Ab)试剂盒 Human Ai FSH Ab ELISA Kit
白头翁皂苷A HPLC≥98% 20mg rabbitThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit兔子促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
白头翁皂苷B HPLC≥98% 2mg 载玻片细胞CDK4蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
白头翁皂苷B HPLC-ELSD≥95% 20mg Humanβamyloidprecursorprotein,βAPPELISA试剂盒人淀粉样体蛋白(βAPP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
白头翁皂苷D HPLC≥98% 5mg 小鼠组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)ELISA试剂盒 ,英文名: TIMP4 ELISA Kit
白鲜碱 HPLC≥98% 20mg 鸭白介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒DuckIerleukin6,IL-6ELISAKit 96T/48T
白杨素 HPLC≥98% 20mg 犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试剂盒 Canine hepatitis B virus surface aigen,HBsAg ELISA Kit
白杨素葡萄糖醛酸苷 HPLC≥98% 20mg 英文名称MouseBALPELISAKit小鼠BALP规格:96T/48T
白芷属脑 HPLC≥98% 20mg 冰冻切片组织组蛋白荧光显微镜检测试剂盒10/20
百两金素A HPLC≥98% 20mg RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISA试剂盒RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISA试剂盒大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人载脂蛋白B(ApoB)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:APOB, FLDB, LDLCQ4, apoB-100, apoB-48, apolipoprotein B Human ApoB(Apolipoprotein B) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组ApoB浓度
高GC PCR扩增试剂盒人防御素β2(DEFβ2/DEFB2)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:DEFB4A, BD-2, DEFB-2, DEFB102, DEFB4, HBD-2, SAP1, Beta-defensin 2, defensin beta 4A,Beta-defensin 4A,Defensin, beta 2,Skin-antimicrobial peptide 1 Human DEFβ2/DEFB2(Defensin Beta 2) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组DEFβ2/DEFB2浓度
热门标签:高GC,PCR扩增试剂盒













