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可视化LAMP扩增试剂盒(防污染)
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详细内容
本试剂盒在2×LAMP MagicMix中整合了dUTP-UNG防污染系统,解决了LAMP扩增非常容易污染的这个棘手问题。同时整合了本公司的LAMP可见光染料(货号:BTN130833),不需要任何仪器即可肉眼判断是否有扩增。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 可视化LAMP扩增试剂盒(防污染) | Colorimetric LAMP Kit(anti-contamination) | 50次 |
本试剂盒使用改良的Bst DNA聚合酶,使本产品既可用DNA为模板于LAMP扩增,也可用RNA模板进行RT-LAMP扩增。DNA聚合酶只有在40℃以上时扩增才启动,反应特异性更强。扩增效率更高,扩增效率可达到109~1010,比PCR灵敏一个数量,可检测到单拷贝的DNA分子。
保存条件:-20℃保存,有效期一年。

注意事项:
1.引物设计对成功扩增十分关键。除用于SNP分型外,尽量以保守区设计引物。
2.引物至少包括F3/B3和FIP/BIP,加入环状引物F loop/B loop可以使反应速度大大提高。
3.应优化引物序列、GC含量和尽量避免二结构。
4.LAMP扩增具有特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备等优点。
5.要确证扩增的为目标基因,可以使用特定的限制性酶切和/或Southern杂交。
使用方法:
1.配制自备的5×LAMP引物混合液。
? 先加超纯水(不要用TE)将各引物干粉稀释到母液浓度,然后在一新的离心管中按表中所列体积加入各种引物和超纯水,后得到1mL的5×LAMP引物混合液。如果需要配制的5×LAMP引物混合液体积大于或小于1mL,则各成分的用量请按比例调整。此混合液可以在-20℃放置2年。
麦冬皂苷C HPLC≥98% 5mg 化微粒体0脂酶D(PhospholipaseD)总活性荧光定量检测试剂盒20
麦冬皂苷D HPLC≥98% 20mg RatImmunoglobulinE,IgEELISA试剂盒大鼠球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒规格:96T/48T
麦冬皂苷D' HPLC≥96% 10mg 小鼠长停滞特异性基因产物6(gas-6)ELISA试剂盒 ,英文名: gas-6 ELISA Kit
甾醇 HPLC≥98% 100mg 小鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA检测试剂盒MouseEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 96T/48T
麦芽糖 HPLC≥98% 20mg 人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)试剂盒 Human M-CSF ELISA kit
蔓荆子黄素 HPLC≥98% 20mg RatAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AMAC-1ELISAKit大鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
芒柄花黄素 HPLC≥98% 20mg 载玻片细胞钙ATP酶PMCA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20
芒果苷 HPLC≥98% 20mg Mouseacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA试剂盒小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒规格:96T/48T
莽草酸 HPLC≥98% 20mg 小鼠粘蛋白5B(MUC5B)ELISA试剂盒 ,英文名: MUC5B ELISA Kit
猫眼草黄素 HPLC≥98% 10mg 血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA检测试剂盒MonkeyPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 96T/48T
人成纤维细胞生长因子9(FGF9)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:FGF-9, GAF, HBFG9, HBFG-9, SYNS3 Human FGF9(Fibroblast Growth Factor 9) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组FGF9浓度
可视化LAMP扩增试剂盒(防污染)人生长停滞特异性蛋白6(Gas6)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:GAS-6, AXLLG, AXSF Human Gas6(Growth Arrest Specific Protein 6) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组Gas6浓度
产品仅用于科研操作程序:
注意:重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2⁻⁷.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗*:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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